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Cas9穩(wěn)定表達的人肺癌細胞;A549-Cas9-538說明書現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | Cas9穩(wěn)定表達的人肺癌細胞;A549-Cas9-538說明書 |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使A549細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:3~1:8傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D12S391:18,19;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:14,17;D19S433:29,29;D21S11:29,29;D2S1338:24,24;D3S1358:16,16;D5S818:11,11;D6S1043:11,13;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:23,23;Penta E:7,11;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:14,14;
同工酶
染色體
使用權限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。M15 菌種1mL
2,4- 二氯苯氧5g
神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒100 次
通用型 LAMP 試劑盒50 次
131276-250Baker 甲醛鈣中性固定液250 mL
130971-50柱式病毒 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
鳥嘌呤5g
96 孔板病毒 DNAout( 離心法 )1次
DiI( 細胞膜紅色熒光探針 )10mg
硝酸纖維素膜,13×20cm1張
22-0270-10DiO( 細胞膜綠色熒光探針 )10mg
3660-250非凍型組織 DNA 保存液250mL
葡聚糖凝膠 G-50 中顆粒25g
苯酚紅5g
U0126(MEK1/2 抑制劑 )1mg
核酸外切酶 I750U
23-0840-1Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor)1mg
70702-50分枝桿菌 DNAout50 次
Rosetta 菌種1mL
超氧化物歧化酶測試盒48 TDibutyltin maleate二丁基馬來酸錫1978/4/6
DIFORMYLIMIDE SODIUM SALT二酰氨基18197-26-7
5-Bromo-2-fluorobenzonitrile5-溴-2-179897-89-3
Potassium methoxide醇鉀865-33-8
DL-HomoserineDL-高絲氨酸1927-25-9
2-Fluoro-4-nitrotoluene2--4-基1427-07-2
4-NITROPHENYL-N-ACETYL-BETA-D-GLUCOSAMINIDE4-基基-2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖苷3459-18-5
SINIGRIN MONOHYDRATE介子苷64550-88-5
beta-Diphosphopyridine nucleotide煙酰胺腺嘌呤雙核苷酸53-84-9
Cyclobutylamine環(huán)丁基胺2516-34-9
NAtris 乙酸
1-Boc-4-(aminomethyl)piperidine4-氨基基-1-Boc-啶144222-22-0
(5E,9E)-6,10,14-Trimethylpentadeca-5,9,13-trien-2-one法尼基丙1117-52-8
2-Bromo-2-methylpropionic acid2-溴代異丁酸2052/1/9
N-AcetylethylenediamineN-乙?;?001-53-2
Twofold Lactose Bile Salt Broth雙料乳糖膽胨水
CALCIUM PYROPHOSPHATE焦磷酸鈣7790-76-3
CHLOROXURON枯草隆1982-47-4
Abscisic acid脫落酸14375-45-2
CHLOROFORM-D氘代仿-d865-49-6
(+/-)1-(1-Naphthyl)ethylamine1-萘乙胺42882-31-5
6-Undecanone6-十一927-49-1
Xylene Cyanole FF二FF2650-17-1
1-TRIMETHYLSILYLMETHANOL三基硅基醇3219-63-4
DEPC 水100mL
大鼠內(nèi)皮細胞分離液 1.066200mL
18-0210-48超氧化物歧化酶測試盒48 T
101218-100DNA Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )100g