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Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞;MKN-45-Cas9-526說明書現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產品名稱 | Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞;MKN-45-Cas9-526說明書 |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態(tài)特性 圓形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 建議初始濃度2.0×105 cells/ml,1:3傳代;4~5天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,12;D12S391:26,26;D13S317:8,11;D16S539:10,10;D18S51:16,16;D19S433:14,16.2;D21S11:31,31;D2S1338:18,18;D3S1358:15,16;D5S818:10,11;D6S1043:14,14;D7S820:10,11;D8S1179:13,17;FGA:19,24;Penta E:10,10;TH01:7,7;TPOX:8,8;vWA:19,19;
同工酶
染色體
使用權限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數據,用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。胰蛋白酶干粉50g
膠原酶Ⅲ型100mg
玫瑰紅鹽5g
山羊抗小鼠 IgG,藻紅蛋白標記0.1mg
CAS553-24-2中性紅5g
130581-1000小鼠抗 mCherry 標簽單抗1000μL
植物線粒體總蛋白提取試劑盒50 次
L- 賴氨酸鹽酸鹽25g
魚藤酮1g
柱式微生物基因組 DNAout 50 次
CAS65099-79-8交聯瓊脂糖凝膠 2B100mL
81204-10SDS-PAGE 上樣液,5×10mL
柱式植物 RNAout50 次
硫酸慶大霉素溶液 ,15mg/mL2mLEC 1.1.1.28乳酸脫氫酶9028-36-8
HEPTADECANOIC ACID十七碳酸506-12-7
1-Methyl-2-phenylindole1-基-2-基吲哚3558-24-5
4'-AMINOPROPIOPHENONE4-胺基丙70-69-9
(S)-(+)-1,2-Propanediol(S)-(+)-1,2-丙二醇4254-15-3
2-FLUORO-4-(TRIFLUOROMETHYL)BENZYLAMINE2--4-三基芐胺239087-05-9
Z-LYS(BOC)-OHZ-丁氧羰基賴氨酸2389-60-8
N-[(Trimethylsilyl)methyl]benzylamineN-[(三基硅)基]芐胺53215-95-5
6-METHOXY-2-METHYLBENZOTHIAZOLE6-氧基-2-基并噻唑2941-72-2
ETHYL 3-METHYL-4-OXOCROTONATE3-?;?2-丁酸乙酯62054-49-3
NA樹蘭浸膏
4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonylfluoride hydrochloride4-(2-氨乙基)磺酰酸30827-99-7
Lithium aluminium hydride氫化鋁鋰16853-85-3
Eleutheroside E刺五加甙 E39432-56-9
NUTRIENT BROTH NO. 4, FOR MICROBIOLOGY營養(yǎng)肉湯
Capillarisin茵陳色原56365-38-9
(1S,2S)-(-)-1,2-DIAMINOCYCLOHEXANE-N,N'-BIS(2'-DIPHENYLPHOSPHINOBENZOYL)(S,S)-DACH-基特羅斯特配體169689-05-8
Naphthalene萘91-20-3
Valeraldehyde正110-62-3
DNA 酶,Ⅱ型80U
CuZn/Mn-SOD 活性檢測試劑盒 (WST 法 )100 次
CAS9001-05-2過氧化氫酶10mL
131146-100山羊抗人 IgG(H+L),堿性磷酸酶標記100μL
3071-50血液 RNAout 50 次
木瓜蛋白酶抑制劑溶液,0.5 mg/mL10mL
4- 氯 -1- 萘酚5g