人子宮內膜低分化腺癌細胞；EAG3圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人子宮內膜低分化腺癌細胞；EAG3圖片
形態(tài)特性  上皮樣；多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性   
培養(yǎng)條件  DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS
傳代方法  1:2傳代，3天傳代一次
傳代情況 P21
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+36%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

角質細胞生長因子 - 不含 BPE5mL
L- 甲硫氨酸25g
ECL 法生物素雜交檢測試劑盒5次
CAS3150-24-1對硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷1g
130584-1000小鼠抗 T7 標簽單抗1000μL
植物種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
L- 蘋果酸25g
蘇丹Ⅲ5g
超敏化學發(fā)光（HRP）檢測試劑盒 2.0 50mL
CAS112926-00-8變色硅膠50g
100909-200長效期 SDS-PAGE 配膠液200mL
柱式質粒 DNAout50 次
魯米諾1g
梭菌蛋白酶10μg
H5N1 神經氨酸酶抑制劑鑒定試劑盒100 次 Anthraquinone蒽醌84-65-1
Propyl 4-hydroxy-3-iodobenzoate4-羥基-3-碘酸丙酯15126-08-6
1-Indanone1-茚83-33-0
Nalpha-Fmoc-L-tyrosineFmoc-L-酪氨酸92954-90-0
Methyl 2,5-dihydroxybenzoate2，5-二羥基酸酯2150-46-1
5-METHOXY-2-METHYLINDOLE5-氧基-2-基吲哚1076-74-0
Tetracaine丁卡因94-24-6
3-Cyanobenzoic acid3-基酸1877-72-1
DL-Arginine hydrochloride monohydrateDL-精氨酸酸(一水)32042-43-6
4-Nitrophenyl isocyanate異酸對基100-28-7
Vinyltrimethoxysilane乙基三氧基硅烷2768/2/7
NA(R)-2-四氫萘胺
FRAXINELLONE梣28808-62-0
MONALIDE庚酰草胺7287-36-7
lurium tetrachloride四化碲10026-07-0
FMOC-CYS(ACM)-WANG RESINFMOC-CYS(ACM)-WANG RESIN
3-Methylphenethyl alcohol3-基乙醇1875-89-4
Harpagoside哈巴俄苷19210-12-9
Ethyl (trimethylsilyl)acetate三基硅乙酸乙酯4071-88-9
3,4',5-TRIMETHOXY-TRANS-STILBENE白藜蘆醇三22255-22-7
Dibenzothiophene二并噻吩132-65-0
4-Fluorophenethyl alcohol對乙醇7589-27-7
CAS9001-12-1膠原酶Ⅰ型100mg
131150-100山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記100μL
80929-250液體樣品 RNAout250 次
N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -2- 氨基乙烷磺酸5g
4mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個
前脂肪細胞生長因子5mL