詳細介紹
人肺腺癌細胞;SPC-A1圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肺腺癌細胞;SPC-A1圖片
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 STR檢測發(fā)現(xiàn)該細胞可能被HeLa細胞污染。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
CAS92-32-0吡啰紅 G5g
131119-200HRP 穩(wěn)定劑 / 稀釋劑200mL
140466A-100酚 - 混合液 (RNA 提取 )100mL
Origami(DE3) 菌種1mL
CCK-8 細胞增殖及毒性檢測試劑盒5mL
軟骨 RNAout50 次
RNA 溶解液10mL
D016-1克隆技術(shù)服務(wù)一個蛋白
81024-10DH5α 化學(xué)感受態(tài)細胞0.1mL×10
小鼠抗 GST 標簽單抗1000μL
即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次
氯化100g
EcoRV1500U
超快蛋白銀染試劑盒1000mL
23-0090-2BAY11-7082(NF-κB 抑制劑 )2mg
60607-100液相內(nèi)毒素清除劑100 次Lobetyolin黨參炔苷136085-37-5
cis-3-Hexenyl benzoate酸葉醇酯25152-85-6
Sodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸151-21-3
1-Bromobutane溴正丁烷109-65-9
NAGVPC瓊脂平板(9cm)
Povidone iodine聚乙吡咯烷碘絡(luò)合物25655-41-8
1,3-Bis(diphenylphosphino)propane1,3-雙(二膦基)丙烷6737-42-4
NA層析聚酰胺樹脂
Sodium borohydride氫化16940-66-2
NA伊紅次基蘭
Glycolic acid乙醇酸79-14-1
L-GLUTAMIC ACID GAMMA-(BETA-NAPHTHYLAMIDE)N-(L-谷氨酰基)-β-萘胺14525-44-1
Barium boron oxide偏酸鋇13701-59-2
Tetrahydrothiophen-3-one四氫噻吩-3-1003-04-9
Fmoc-S-acetamidomethyl-L-cysteineFMOC-S-乙酰氨基-L-半胱氨酸86060-81-3
D-LYXOSED(-)-來蘇糖1114-34-7
Bis(acetylacetonato)cobalt乙酰丙鈷(II)14024-48-7
Haloxyfop-etotyl吡禾靈87237-48-7
Tocopheryl acetate生育酚乙酸酯7695-91-2
4-(2-PYRIDYLAZO)RESORCINOL MONOSODIUM SALT HYDRATE4-(2-吡啶偶氮)間二酚16593-81-0
Tributyl(vinyl)tin三丁基乙基錫7486-35-3
1-Bromopentane1-溴烷110-53-2
(-)-Dibenzoyl-L-tartaric acid monohydra-(-)-二酰酒石酸一水物62708-56-9
2,3,6-TRICHLOROPHENOL2,3,6-三酚933-75-5
DL-ALANYL-DL-NORVALINEDL-丙氨酰-DL-正纈氨酸2325-18-0
乳酸測試盒 ( 測血清、組織等 )48 T
DNA 上樣液 ( 藍 ),6×10mL
DNA 75% 乙醇250mL
TEV 蛋白酶300U
140310-10DMEM( 低糖 )10L
130886-50植物線粒體總蛋白提取試劑盒50 次