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人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R圖片

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更新時(shí)間:2017-01-07 08:17:05瀏覽次數(shù):343

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷(xiāo)售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細(xì)胞名稱 人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系源于多能腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞系NCI-H295,后者由Gazdar AF等建立,從腎上腺皮質(zhì)的腫瘤中分離而來(lái)。NCI-H295細(xì)胞經(jīng)改變培養(yǎng)條件獲得了NCI-295R細(xì)胞,群體倍增時(shí)間從原來(lái)的5天減為2天。NCI-295細(xì)胞懸浮生長(zhǎng),而NCI-H295R呈單層貼壁生長(zhǎng)。NCI-H295R細(xì)胞保留了產(chǎn)生雄激素的能力,對(duì)血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應(yīng)。 
培養(yǎng)條件  DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  Nu-Serum I, 2.5%;15 mM HEPES+0.00625 mg/ml insulin+0.00625 mg/ml transferrin+6.25 ng/ml selenium+1.25 mg/ml bovine serum albumin+0.00535 mg/ml linoleic acid
傳代方法  1:3~1:4傳代;每周換液2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:13;D16S539:11;D18S51:17;D19S433:13;D21S11:32.2;D2S1338:25;D3S1358:15,16;D5S818:12;D7S820:9,12;D8S1179:13;FGA:19.2,24;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:17,18;
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

黃嘌呤氧化酶5u
非變性蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)25mg
CAS5704-04-1N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基甘氨酸10g
131108-1ONPG 干粉1g
β-D- 阿糖胞苷50mg
MEQ,(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 )100mg
1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷5g
抑制與產(chǎn)生超氧陰離子自由基測(cè)試盒 ( 比色法 )50 T
酸洗玻璃珠系列10g
131288-250Maximov 固定液250 mL
81103-25一站式真菌 mRNAout25 次
檸檬酸 ( 無(wú)水 )100g
Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL
Indo-1,五銨鹽1mgGlyoxylic acid monohydrate乙酸水合物563-96-2
Sodium dehydroacetate脫氫醋酸4418-26-2
KASUGAMYCIN HYDROCHLORIDE HYDRATE春雷霉素酸19408-46-9
D-Phenylalanine methyl ester hydrochlorideD-丙氨酸酯酸13033-84-6
COPPER(II) HEXAFLUOROACETYLACETONATE HYDRATE, 98雙(六乙酰丙)合銅(II)水合物155640-85-0
2-BROMO-5-METHOXYANILINE2-溴-5-氧基胺59557-92-5
Sodium 1-octanesulfonate1-烷磺酸5324-84-5
Furfuryl thioacetate乙酸糠硫醇酯13678-68-7
5-BROMO-4-CHLORO-3-INDOLYL B-D-5-溴-4--3-吲哚基-BETA-D-葡糖苷酸環(huán)己胺114162-64-0
2,6-Difluoroaniline2,6-5509-65-9
1-PHENOLPHTHALEIN1-酚酞
2-Amino-4-chlorobenzoic acid2-氨基-4-酸89-77-0
4-N-PROPOXYBENZALDEHYDE4-丙氧基5736-85-6
Hydroxyurea羥基脲127-07-1
2,2'-Biquinoline2,2'-聯(lián)喹啉119-91-5
NA3%化胰胳胨大豆瓊脂
2-Azabicyclo[2.2.1]hept-5-en-3-one2-氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚-5--3-49805-30-3
環(huán)狀 DNA 全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次
22-0430-10Lucigenin( 光澤精 )10mg
90901-200菌體內(nèi)毒素清除劑200mL

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