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人低分化肺腺癌細(xì)胞;SK-LU-1圖片

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更新時(shí)間:2017-01-07 08:08:24瀏覽次數(shù):371

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產(chǎn)品簡介

人低分化肺腺癌細(xì)胞;SK-LU-1圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

人低分化肺腺癌細(xì)胞;SK-LU-1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細(xì)胞名稱 人低分化肺腺癌細(xì)胞;SK-LU-1圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞系源于一位60歲的白人女性患者的肺腺癌組織。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS;1%NEAA, 1mM丙酮酸鈉
傳代方法  1:2傳代;每周換液2次。
傳代情況 P58
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:10;D16S539:8;D18S51:18;D19S433:15;D21S11:29,30,30.2;D2S1338:16,17;D3S1358:18;D5S818:11;D7S820:9;D8S1179:10;FGA:21,22;TH01:7;TPOX:8,10;vWA:16,17;
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

IPTG 溶液,200mg/mL1.5mL
Bsu DNA 聚合酶,大片段200U
140438-500腦心浸液500g
12-263Y1090 菌種1mL
一管式 TMB 顯色液 A( 可溶型 ) 100mL
抗酒石酸酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒120 次 
聚乙烯吡咯烷酮 40000100g
真空抽濾盒1套
CAS9036-19-5曲拉通 X-114100mL
81207-20半干法電轉(zhuǎn)液 ( 干粉 )20L
λ 噬菌體 DNAout50 次
MgCl2溶液,25mM,PCR 5mL
1.5 mL RNase-free 離心管500 支LITHIUM NIOBATE鈮酸鋰12031-63-9
2,6-Dichloroaniline2,6-608-31-1
PINORESINOL DIGLUCOSIDE(P)(PLEASE CALL)松脂醇二葡萄糖苷63902-38-5
4-CHLORO-6-ETHYL-2-PYRIMIDINAMINE2-氨基-4--6-乙基嘧啶5734-67-8
Nickel(II) acetate tetrahydrate乙酸鎳6018-89-9
Trifluorothymine5-三基尿嘧啶54-20-6
alpha,alpha-Diphenyl-4-piperidinomethanolα,α-二基-4-啶醇115-46-8
Dioscin薯蕷皂甙19057-60-4
Bis-(3-phthalyl anhydride) ether4,4′-聯(lián)二酐1823-59-2
Chlorophenol Red酚紅4430-20-0
2,7-Dibromonaphthalene2,7-二溴萘58556-75-5
2-Chlorobenzonitrile鄰873-32-5
Ethyl oxalyl monochloride草酰單乙酯4755-77-5
Pyridoxamine dihydrochloride吡哆胺二酸524-36-7
Aluminum oxide氧化鋁1344-28-1
2,6-Dichlorotoluene2,6-二118-69-4
Alkaline Peptone Water性蛋白胨水
4-Amino-m-cresol4-氨基-3-基酚2835-99-6
DL-TryptophanDL-色氨酸1954/12/6
NAPHTHENIC ACID SODIUM SALT環(huán)烷酸61790-13-4
總 SOD 活性檢測(cè)試劑盒 (WST 法 )100 次
超快轉(zhuǎn)染試劑盒1mL
131290-250PLPD 固定液250 mL
130976-100Oligo(dT) 再生溶液100mL

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