綠色熒光蛋白標記人宮頸癌細胞；HeLa-GFP圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 綠色熒光蛋白標記人宮頸癌細胞；HeLa-GFP圖片
形態(tài)特性  上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  轉(zhuǎn)染pEGFP-N1，穩(wěn)定表達綠色熒光蛋白。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；G418 200ug/ml
傳代方法  1:3傳代；5~7天1次。
傳代情況 P5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：9，10；D13S317：12，13.3；D16S539：9，10；D18S51：16； D19S433：13；D21S11：27，28；D2S1338：17；D3S1358：15，18；D5S818：11，12；D7S820：8，12；D8S1179：12，13；FGA：21；TH01：7；TPOX：8，12；vWA：16，18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

140595-100小鼠抗 Trx 標簽蛋白單抗 100 μL
植物種屬鑒定 PCR Mix 8100 次
L- 天門冬酰胺25g
果膠25g
COX IV 小鼠單抗1000 μL
CAS7681-49-4氟化25g
81225-250Tricine-SDS-PAGE 配膠液250mL
自誘導培養(yǎng)基 (lac 啟動子 )200mL
羅丹明 B10g
糜蛋白酶原1 g
超氧化物試劑盒100 次
CAS9001-51-8己糖激酶2.5KU
131158-0.1山羊抗兔 IgG，熒光素 488 標記0.1mg
130829-50天凈沙細胞蛋白質(zhì) -RNA 雙提取試劑盒 50 次
N-2- 羥乙基 -N’-2- 乙基磺酸25g
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷100mg
髓核細胞生長因子5mL
電泳過硫酸銨0.1gx10
21-0400-5星形膠質(zhì)細胞生長因子5mL
90710-100RNA  SDS( 十二烷基硫酸 )100gIminodiacetonitrile亞氨基二乙628-87-5
Sodium taurocholate牛磺膽酸145-42-6
HAFNIUM鉿標準溶液7440-58-6
DIRECT FAST BROWN M直接紅棕M2429-82-5
Octadecyl 3-(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl)propionate抗氧劑10762082-79-3
Tetrabutylphosphonium chloride四丁基化膦2304-30-5
DIETHYLAMINO HYDROXYBENZOYL HEXYL BENZOATE二乙氨基羥酰基酸己酯302776-68-7
Oxobutanedioic acid草酰乙酸328-42-7
CHLORIDE STANDARD離子（Cl-）標準溶液16887-00-6
NAECL化學發(fā)光液
2,4,6-Trimethylbenzoyl chloride2,4,6-三基酰938-18-1
2,6-DIMETHYLNAPHTHALENE二基萘28804-88-8
4-Methoxyphenylacetone對氧基基丙122-84-9
Giemsa stain吉氏色素51811-82-6
tert-Butyl hydroperoxide過氧化氫叔丁醇75-91-2
TRIFLUOROMETHANESULFONAMIDE三磺酰胺421-85-2
Oxazole-2-amine2-氨基惡唑4570-45-0
2,5,6-TRIMETHYLBENZOXAZOLE2,5,6-三基并唑19219-98-8
Calconcarboxylic acid鈣試劑羧酸3737-95-9
Litmus paper blue藍石蕊試紙
LEAD(II) SULFIDE硫化鉛1314-87-0