詳細(xì)介紹
人十二脂腸腺癌;HuTu-80價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人十二脂腸腺癌;HuTu-80價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 每個細(xì)胞上蛙皮素受體的位點多達6000個。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;1%NEAA
傳代方法 1:2~1:5傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 P143
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,13;D13S317:8,11;D16S539:10,11;D18S51:14,17;D19S433:13,15.2;D21S11:31,32.2;D2S1338:17,21;D3S1358:15,17;D5S818:12,13;D7S820:9,11;D8S1179:15;FGA:21,23;TH01:7;TPOX:9,11;vWA:16,18;
同工酶
染色體 40~47,XY
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Hep 3B(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
豬髖動脈內(nèi)細(xì)胞英文名稱:PIEC
CHO, 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系
小鼠結(jié)腸細(xì)胞英文名稱:CT-26 WT
6T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人子宮頸上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
BPLS瓊脂/BPLS Agar各種標(biāo)本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
大鼠腦動脈血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HCC827(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
甘露醇發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
人永生化角質(zhì)細(xì)胞英文名稱:Hacat
EB增菌肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)/EB增菌液/EB Enrichment Broth Medium單核細(xì)胞增生李氏特菌增菌250克國產(chǎn)/進口
人臍動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
V-P半固體瓊脂/Voges-Proskauer Semisolid Agar細(xì)菌V-P試驗250克國產(chǎn)/進口
人肺動脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
肌醇測定培養(yǎng)基/Inositol Assay Broth嬰幼兒配方食品和粉中肌醇測定250克國產(chǎn)/進口
大鼠主動脈內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
品紅亞硫酸鈉瓊脂/Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar飲用水,水源中總大腸菌群的選擇性分離和確認(rèn)250克國產(chǎn)/進口Bis(4-amino-2-chloro-3,5-diethylphenyl)methane4,4'-亞基雙(3--2,6-二乙基胺)106246-33-7
FETAL BOVINE SERUM USA ORIGIN胎牛血清
2,8-BIS(TRIFLUOROMETHYL)-4-BROMOQUINOLINE4-溴-2,8-二(三基)喹啉35853-45-3
N,N,N',N'-TETRAKIS(2-HYDROXYETHYL)ETHYLENEDIAMINEN,N,N',N'-四(2-羥乙基)乙140-07-8
2-Chloro-4-hydroxypyridine2--4-羥基吡啶17368-12-6
METHYL 3-MORPHOLINOPROPIONATE4-啉丙酸酯33611-43-7
Tetrahydropyran四氫吡喃142-68-7
3,5-Dichlorobenzylamine3,5-二芐胺39989-43-0
Ethyl (4-methylthiophenyl)acetate4-硫基乙酸乙酯14062-27-2
2-N-HEXYLCYCLOPENTANONE2-己基環(huán)13074-65-2
L-Asparagine tert-butyl esterL-天冬酰胺叔丁酯25456-86-4
4-Nitrotoluene對基99-99-0
tert-Butyl carbazate叔丁氧羰基肼870-46-2
2-Methylpyrimidine2-基嘧啶5053-43-0
Protopine原阿片130-86-9
Crystal Violet結(jié)晶紫548-62-9
Butyldiglycol二乙二醇丁112-34-5
H-TYR(TBU)-2-CLTRT RESINH-TYR(TBU)-2-CHLOROTRITYL RESIN
Butyl glycidyl ether正丁基縮水甘油2426/8/6
大鼠成肌細(xì)胞英文名稱:L6
小牛血清/Calf serum診斷試劑用200毫升國產(chǎn)/進口
SNU-5(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2