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詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY0928價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY0928價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代；5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
Mebolazine （1 mg）Dimethazine|Roxilon； [（2α,5α,17β）-17β-hydroxy-2α,17-dimethylandrostan-3-ylidene]hydrazone, 17β-hydroxy-2α,17-dimethyl-androstan-3-one
Hydromorphone CRM （2 mL）Exalgo|Jurnista|NSC 19046|Novolaudon； 4,5α-epoxy-3-hydroxy-17-methyl-morphinan-6-one
Streptavidin:SureLight APC Protein Assay Format （1 mg）Streptavidin:SureLight APC Protein Assay Format
生物素標(biāo)記*基化組蛋白H3K4多肽Biotinylated Trimethyl Histone H3K4 Peptide （200 ul）
Z-DEVD-FMK， Caspase-3抑制劑（氟甲基酮）Caspase-3 Inhibitor Z-DEVD-FMK
Z-VAD-FMK， Caspase-Family抑制劑（氟甲基酮）Z-VAD-FMK
AZD-0530Saracatinib （AZD0530）
5-[（2-hydroxy-5，8-dihydronaphthalen-1-yl）methyl]-6-phenyl-2-thioxo-2，3-dihydropyrimidin-4（1H）-one； NSC-112546Cambinol
4-（Acetylamino）-N-（2-aminophenyl）benzamide， Acetyldinaline， GCI-994
蛋白酶抑制劑套裝II， EZBlockEZBlock Protease Inhibitor Cocktail II
FHRRIKAHeparin-Binding Peptide III
5-Pioglitazone
2-UNC0638
4-（1，1，3，3-Tetramethylbutyl）phenyl-polyethylene glycol， t-Octylphenoxypolyethoxyethanol， Polyethylene glycol tert-octylphenyl etherTriton X-100， MegaPure Detergent， 10% Solution
T-47D(人腺管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SK-MEL-1(人膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
ProteinShow-G250蛋白快速染色試劑1000ml國(guó)產(chǎn)gersion
B16-F10(小鼠膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Molt-4(人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HuH-7人肝細(xì)胞
C6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
eECL Western Blot Kit/高靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒250ml25ml、100ml、250ml
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞
ARPE-19(人視網(wǎng)膜上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠白血病細(xì)胞英文名稱：L1210
1640培養(yǎng)基/1640 Medium/RPMI 1640含L-谷氨酰胺，不含碳酸氫鈉10升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人食管細(xì)胞英文名稱：CaEs-17
MR-VP培養(yǎng)基/MR-VP試驗(yàn)用培養(yǎng)基/緩沖葡萄糖肉湯/葡萄糖磷酸鹽肉湯/MR VP Broth腸桿菌科細(xì)菌的甲基紅和VP試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人結(jié)直腸腺細(xì)胞英文名稱：HCT-15
蛋白胨/PeptoneBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
2-（3，4-Dimethoxybenzenesulfonylamino）-4-（3-Nitrophenyl）-5-（Piperidin-1-yl）MethylthiazoleJM6
3，4-Methylenedioxy-β-nitrostyreneMDBN
4-HNE4-Hydroxynonenal
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