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腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293圖片

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更新時間:2017-01-05 09:42:59瀏覽次數:377

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293圖片售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細介紹

腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293圖片
形態(tài)特性  上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  我們推薦使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株,但產生的病毒滴度更高。 HEK293細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉染的人胚腎細胞。 跟HEK293細胞一樣,AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因,當共轉染三個AAV助質粒(一個含ITR的質粒,pAAV-RC, 和E1缺失助質粒)時,可以產生有感染力的腺病毒-相關病毒顆粒。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR  Amelogenin:X;CSF1PO:7,11,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

糖原Ⅲ型    500mg
陶瓷研缽 ( 直徑 60 mm)    1個
陶瓷研缽 ( 直徑 75 mm)    1個
天冬氨酸轉氨酶    500 U
天凈沙 DNA 甲基化修飾試劑盒    150 次
天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴增試劑盒    20 次
天凈沙 SPIA 擴增試劑盒 ( 用于擴增 DNA 模板 )    20 次
天凈沙單細胞 RNA 擴增試劑盒    80 次
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒    5次
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒    5次
天凈沙核酸濃縮劑    30mL
天凈沙甲基化 PCR 2.0 試劑盒    150 次
天凈沙鎳柱原位再生試劑盒    20 次
天凈沙通用型MLPA 試劑盒    20 次
天凈沙細胞蛋白質 -RNA 雙提取試劑盒     50 次
天狼猩紅    5g
天門冬酰胺酶    250UAFC[7-氨基-4-三氟甲基香豆素] 熒光參照標準AFC [7-Amino-4-trifluoromethylcoumarin] Fluorescence reference standard
6-TAMRA, SE [6-羧基四甲基羅丹明,琥珀酰亞胺酯] 可標記寡核苷酸6-TAMRA, SE [6-Carboxytetramethylrhodamine, succinimidyl ester] Validated for labeling oligos
TQ3 馬來酰亞胺Tide Quencher 3 maleimide [TQ3 maleimide]
5/6-TAMRA標記的Asp天冬氨酸FMOC-Asp(5/6-TAMRA)-OH
二肽酰多肽酶IV (DPPIV)熒光底物Gly-Pro-AMCGly-Pro-AMC
Pluronic F-127 20%溶液于DMSO中Pluronic F-127 20% solution in DMSO
pH熒光探針BCBCF酸BCBCF acid
5(6)-FAM氨基磷酸酯5(6)-FAM Phosphoramidite
FMOC-4,5-dehydro-L-Leu-OHFMOC-4,5-dehydro-L-Leu-OH
鬼筆環(huán)肽-iFluor 594偶聯(lián)物Phalloidin-iFluor 594 Conjugate
Cyanine 3酰肼 [相當于Cy3酰肼]Cyanine 3 hydrazide [equivalent to Cy3 hydrazide]
FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMKFITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK
Cal-520 馬來酰亞胺Cal-520 maleimide
2C-T-2 (hydrochloride) (50 mg)4-(ethylthio)-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride; 2,5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine; 2C-T-2 (hydrochloride)
Prostaglandin D1 (10 mg)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxo-prost-13E-en-1-oic acid; PGD1; Prostaglandin D1
Canertinib (hydrochloride) (25 mg)N-[4-[(3-chloro-4-fluorophenyl)amino]-7-[3-(4-morpholinyl)propoxy]-6-quinazolinyl]-2-propenamide, dihydrochloride; CI 1033|PD 183805; Canertinib (hydrochloride)
2-methyl Benzamideoxime (1 g)(Z)-N’-hydroxy-2-methylbenzimidamide; 2-methyl Benzamideoxime
2-(4-Pyridyl)-4-methyl-thiazole-5-Carboxylic Acid (100 mg)4-methyl-2-(4-pyridinyl)-5-thiazolecarboxylic acid; 2-(4-Pyridyl)-4-methyl-thiazole-5-Carboxylic Acid
天然蛋白 A    1mg
甜菜堿    10g
甜菜堿溶液,5M,PCR     1.5mL
甜菜堿鹽酸鹽    100g
填入法 DNA 末端標記試劑盒 A    5次

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