詳細(xì)介紹
人支氣管上皮樣細(xì)胞;BEAS-2B*操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人支氣管上皮樣細(xì)胞;BEAS-2B*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一正常人的支氣管上皮組織。后經(jīng)Ad12SV40病毒感染并克隆。該細(xì)胞可用于檢測(cè)化學(xué)和生物制劑的致癌作用。
培養(yǎng)條件 LCH-8
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN16
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR Amelogenin:X, Y;D8S1179:13, 15;D21S1128, 30;D7S820:10, 13;CSF1PO:9, 12;D3S1358:15, 17;TH01:7, 9.3;D13S317:13;D16S539:12;D2S1338:22, 23;D19S433:13.2, 15.2;vWA:17, 18;THOX:6, 11;D18S51:18, 19;D5S818:12, 13;FGA:20, 24。
同工酶
染色體 47-48
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
RNase-free 75% 乙 250mL
RNase-free CTAB 溶液 ,20% 100mL
RNase-free DTT 溶液 ,1M 10mL
RNase-free EDTA 溶液 ,0.5M,pH 8.0 100mL
RNase-free PVP K30 溶液 ,20% 100mL
RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10% 100mL
RNase-free SDS 溶液 ,10% 100mL
RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5 100mL
RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.0 100mL
RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.5 100mL
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.0 100mL
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5 100mL
RNase-free Tris HCl,1M,pH 9.0 100mL
RNase-free 氯化鋰溶液 ,10M 100mL
RNase-free 水 1mL
RNase-free 水 10mLGSK-2830371GSK2830371
4-AM580
2-Bromo-N-[3-[(1-oxobutyl)amino]phenyl]benzamideML161
2-SirtACt
Mouse IgG, 1 mgMouse IgG
Heparin Sepharose ColumnHeparin Sepharose Column
Bovine Serum Albumin – Heat Shock, Protease DNASE Free, pH 7.0Bovine Serum Albumin – Heat Shock, Protease DNASE Free, pH 7.0
LSD Peptide Substrate (1。2 mL)LSD Peptide Substrate
環(huán)氧甲酮四肽蛋白酶體抑制劑Epoxomicin
H2S donor sampler packH2S donor sampler pack
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 50 kDaDiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 50 kDa
11-S)-HETE Lipid Maps MS Standard (250 ug)11-S)-HETE Lipid Maps MS Standard, 11S-hydroxy-5Z,8Z,12E,14E-eicosatetraenoic acid
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin J2 (10 mg)13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin J2, 11,15-dioxo-prosta-5Z,9-en-1-oic acid
-+)-Muscarine -iodide salt) (25 mg)-+)-Muscarine -iodide salt), 2,5-anhydro-1,4,6-trideoxy-6-(trimethylammonio)-D-ribo-hexitol, iodide
19-R)-hydroxy Prostaglandin B2 (5 mg)19(R)-OH PGB2, 19-R)-hydroxy Prostaglandin B2, 9-oxo-15S,19R-dihydroxy-prosta-5Z,8(12),13E-trien-1-oic acid
17-trifluoromethylphenyl trinor Prostaglandin F2α (50 mg)17-trifluoromethylphenyl trinor PGF2α, 17-trifluoromethylphenyl trinor Prostaglandin F2α, 9α,11α,15S-trihydroxy-17-trifluoromethylphenyl-18,19,2-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
RNase-free 鹽酸胍溶液 ,8M 100mL
RNase-free 乙酸鈉 ,3M,pH 5.2 100mL
RNase-free 異硫氰酸胍溶液 ,5M 100mL
ROS 活性氧檢測(cè)試劑盒 100 T
Rosetta 感受態(tài)細(xì)胞 10×100μL
Rosetta 菌種 1mL
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10