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血管平滑肌細(xì)胞;T/G HA-VSMC*

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更新時(shí)間:2017-01-05 08:42:08瀏覽次數(shù):353

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

血管平滑肌細(xì)胞;T/G HA-VSMC*采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

詳細(xì)介紹

血管平滑肌細(xì)胞;T/G HA-VSMC*操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

血管平滑肌細(xì)胞;T/G HA-VSMC*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書。

產(chǎn)品名稱
用途僅用科研
保存條件4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  T/G HA-VSMC細(xì)胞建系于1992年(Tilberg A F,et al)。該細(xì)胞系屬有限細(xì)胞系,可因連續(xù)傳代而衰老死亡。連續(xù)傳代試驗(yàn)顯示,T/G HA-VSMC細(xì)胞經(jīng)歷15-20個(gè)群體倍增時(shí)間就會(huì)衰老死亡,固需控制有限的傳代次數(shù)。 
培養(yǎng)條件  F12K  10%FBS;加多種生長(zhǎng)因子,詳見參考文獻(xiàn)
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C15
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類運(yùn)輸保存:

采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。

Genistein( 酪氨酸蛋白激酶抑制劑 )    25mg
Glucosamine( 胰島素抵抗誘導(dǎo)劑 )    5g
Golgi-Tracker Red( 高爾基體紅色熒光探針 )    1mg
GpC 甲基轉(zhuǎn)移酶 (M.CviPI)    200U
GS115 酵母菌種    1mL
GS190 酵母菌種    1mL
GS200 酵母菌種    1mL
GSH 和 GSSG 試劑盒    共 100 次
GSH 試劑盒 ( 谷胱甘肽測(cè)試盒 )( 比色法 )    50 T
GSH( 抗氧化劑 )    1g
GSH—PX 測(cè)試盒    50 T
GSH—ST 測(cè)試盒    100 T
GST 固定試劑盒    1套
GTP 溶液,100mM    0.25mL
GTP 溶液,2.5mM    2mL
GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞    10×100μL
1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-PC (100 mg)1,2-diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine; 1,2-DAPC|L-α-Diarachidonoyl lecithin|1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphocholine; 1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-PC
α-NETA (25 mg)N,N,N-trimethyl-γ-oxo-2-naphthalenepropanaminium, monoiodide; α-NETA
ML-191 (10 mg)5-phenyl-3-(1-(1-(p-tolyl)cyclopropane-1-carbonyl)piperidin-4-yl)-1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one; CCG-152883|CID-23612552; ML-191
Epalrestat (10 mg)5Z-[(2E)-2-methyl-3-phenyl-2-propen-1-ylidene]-4-oxo-2-thioxo-3-thiazolidineacetic acid; Kinedak|ONO-2235|Sorbistat; Epalrestat
Fluprostenol-d4 (50 ug)9α,11α,15R-trihydroxy-16-(3-(trifluoromethyl)phenoxy)-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 16-m-trifluoromethylphenoxy tetranor Prostaglandin F2α-d4; Fluprostenol-d4
(S)-(-)-1,1’-Bi-2-naphthol (500 mg)(S)-[1,1’-binaphthalene]-2,2’-diol; (S)-BINOL; (S)-(-)-1,1’-Bi-2-naphthol
CP 47,497-C9-homolog (10 mg)cis-5-(1,1-dimethylnonyl)-2-(3-hydroxycyclohexyl)-phenol; CP 47,497-C9-homolog
α-Linolenoyl Ethanolamide-d4 (500 ug)N-(2-hydroxyethyl-1,1’,2,2’-d4)-octadeca-9Z,12Z,15Z-trienamide; α-Linolenoyl Ethanolamide-d4
Topiramate (50 mg)2,3:4,5-bis-O-(1-methylethylidene)-β-D-fructopyranose 1-sulfamate; Topamax |TPM|Epitomax|McN 4853|RWJ 17021; Topiramate
GV3101 農(nóng)桿菌菌種    1mL
改良 Lowry 法蛋白定量試劑盒    1000 次
鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液,10mg/mL    10mL
鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液,10mg/mL    10mL
鈣離子載體    1mg
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測(cè)試盒    24 T

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