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人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B價格

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更新時間:2017-01-05 08:29:14瀏覽次數(shù):307

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B價格售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B價格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B價格操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  從一位非癌個體的正常人支氣管上皮病理切片分離出上皮細(xì)胞。 這些細(xì)胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆。 DEAS-2B細(xì)胞保留了對血清反應(yīng)進(jìn)行鱗關(guān)分化的能力,并有用于篩選誘導(dǎo)或影響分化及致癌的化學(xué)或生物制劑。 細(xì)胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。 
培養(yǎng)條件   
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(39+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

DNA 上樣液 ( 藍(lán) ),6×    10mL
DNA 上樣液 ( 藍(lán) ),6×( 非甘油 )    10mL
DNA 探針變性液    10mL
DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I    100U
DNA 稀釋液    10mL
DNA 洗脫液    10mL
DNA 洗脫液    50mL
DNA 洗脫液 2.0    10mL
DNA 修復(fù)混合液     150 次
DNA 修復(fù)混合液     30 次
DNA 樣品采樣拭子     50 支
DNA 粘轉(zhuǎn)平試劑盒    20 次
DNase I 干粉    100mg
DNase I 溶液    1.5mL
dNTP 和引物清除劑    100 次
dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )    0.5mL
dNTP 溶液 ,10mM    0.5mL
dNTP 溶液 ,10mM    5mLEdrophonium (chloride) (500 mg)Enlon|Tensilon; N-ethyl-3-hydroxy-N,N-dimethyl-benzenaminium, monochloride
MF498 (5 mg)N-[[[4-(5,9-diethoxy-6,8-dihydro-6-oxo-7H-pyrrolo[3,4-g]quinolin-7-yl)-3-methylphenyl]methyl]sulfonyl]-2-methoxy-benzeneacetamide
N-Ethylpentylone (hydrochloride) (10 mg)1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(ethylamino)-1-pentanone, monohydrochloride
Cefpodoxime (free acid) (25 mg)R 3763; (6R)-7R-[[(2Z)-2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(methoxyimino)acetyl]amino]-3-(methoxymethyl)-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid
N-Acetyl-4-benzoquinone imine (500 ug)N-Acetyl-p-benzoquinonimine|NAPQI; N-(4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene)-acetamide
1-Oxyl-2,2,5,5-tetramethylpyrroline-3-carboxylate NHS ester (5 mg)1-Oxyl-2,2,5,5-tetramethylpyrroline-3-carboxylate N-hydroxysuccinimide ester|NSC 319633|OXYL-1-NHS|Tempyo Ester; 3-
WHI-P154 (5 mg)JAK3 Inhibitor II|Janus-Associated Kinase 3 Inhibitor II; 2-bromo-4-[(6,7-dimethoxy-4-quinazolinyl)amino]-phenol
AWD 131-138 (50 mg)Imepitoin; 1-(4-chlorophenyl)-1,5-dihydro-4-(4-morpholinyl)-2H-imidazol-2-one
PD 0332991 (25 mg)Palbociclib; 6-
dNTP 溶液,100mM     0.5mL
dNTP 溶液,100mM     5mL
dNTP 溶液,2.5mM    0.5mL
dNTP 溶液,2.5mM    5mL
DOP-PCR 試劑盒    50 次
Doxorubicin(Adriamycin) 阿霉素    100μL

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