詳細(xì)介紹
人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞;CCD-1095Sk價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞;CCD-1095Sk價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 此株細(xì)胞從左乳房的活體組織切片的正常皮膚建立。 病人患有乳腺浸潤性導(dǎo)管癌并患有乳頭濕疹樣癌本病。 這一代次的細(xì)胞已經(jīng)過兩次數(shù)目倍增,約可再進(jìn)行10次數(shù)目倍增。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(1+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
次(亞)甲基蘭 10g
次黃嘌呤 1g
次甲基綠 1g
D- 阿拉伯糖 10g
D- 氨基半乳糖鹽酸鹽 250mg
D- 氨基葡萄糖鹽酸鹽 10g
D- 氨基酸氧化酶 5 mg
D- 半乳糖 25g
D- 半乳糖醛酸 1g
D- 泛酸鈣 50g
D- 甘露 250g
D- 甘露糖 5g
D- 果糖 250g
D- 果糖 -1,6- 二磷酸鈉鹽 100mg
D- 果糖 -6- 磷酸二鈉 100mg
D- 海藻糖 5g
D- 核糖 5g9(S)-HODE-d4 (25 ug)9S-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic-9,10,12,13-d4 acid; 9(S)-HODE-d4
8(S),15(S)-DiHETE (25 ug)8S,15S-dihydroxy-5Z,9E,11Z,13E-eicosatetraenoic acid; 8(S),15(S)-DiHETE
ω-3 Arachidonic Acid-d8 (5 mg)8Z,11Z,14Z,17Z-eicosatetraenoic-8,9,11,12,14,15,17,18-d8 acid; ω-3 AA-d8; ω-3 Arachidonic Acid-d8
8-Isoprostane Affinity Column (4 ml) (1 ea)8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α; 8-Isoprostane Affinity Column (4 ml)
Rabbit Anti-Sheep IgG Precoated Solid Plate (5 ea)Rabbit Anti-Sheep IgG Precoated Solid Plate
17-phenyl trinor Prostaglandin F2α EIA Antiserum (100 dtn)Bimatoprost EIA Antiserum; 17-phenyl trinor Prostaglandin F2α EIA Antiserum
15(S)-HpEDE (100 ug)15S-hydroperoxy-11Z,13E-eicosadienoic acid; 15(S)-HpEDE
sPLA2 (human Type IIA) EIA Standard (1 ea)Secretory Phospholipase A2 (human synovial); sPLA2 (human Type IIA) EIA Standard
SEAP Substrate (Luminescence) (15 mL)SEAP Substrate (Luminescence)
TBS Stock Solution (10X, pH 7。4) (1 L)Tris-buffered Saline; TBS Stock Solution (10X, pH 7。4)
2-O-methyl PAF C-16 (50 mg)1-O-hexadecyl-2-O-methyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 2-O-methyl PAF C-16
2-Arachidonyl Glycerol ether (25 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraen-2-glyceryl ether; 2-AG ether|Noladin; 2-Arachidonyl Glycerol ether
Oleyl Trifluoromethyl Ketone (5 mg)1,1,1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one; OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone; Oleyl Trifluoromethyl Ketone
DMSO Assay Reagent (1 ml)DMSO Assay Reagent
D- 棉子糖 10g
D- 葡萄糖 -1- 磷酸二鈉 1g
D- 山梨 250g
D- 生物素 ( 維生素 H) 1g
D- 無水葡萄糖 250g