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技術(shù)文章

人前顆粒體蛋白樣本處理及要求

閱讀:303          發(fā)布時間:2021-12-8

人前顆粒體蛋白樣本處理及要求:


1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。


3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。


4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到


100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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小鼠程序性死亡1(PD-1)ELISA試劑盒

小鼠成纖維細胞生長因子9(FGF9)ELISA試劑盒

小鼠成纖維細胞生長因子8(FGF8)ELISA試劑盒

小鼠成纖維細胞生長因子6(FGF6)ELISA試劑盒

小鼠成纖維細胞生長因子4(FGF4)ELISA試劑盒

小鼠成纖維細胞生長因子13(FGF-13)ELISA試劑盒

小鼠成纖維細胞生長因子10(FGF10)ELISA試劑盒

小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒

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小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒

小鼠草胺膦乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAT)ELISA試劑盒

小鼠不對稱二甲基精氨酸(ADMA)ELISA試劑盒

小鼠補體因子H(CFH)ELISA試劑盒

小鼠補體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒

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