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海藻LAMP鑒定試劑盒實(shí)驗(yàn)使用方法
閱讀:217 發(fā)布時(shí)間:2020-3-25海藻LAMP鑒定試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn)
特異性強(qiáng) PCR反應(yīng)的特異性決定因素為: ①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合...”它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,專(zhuān)一性強(qiáng),只擴(kuò)增海藻,與其他植物沒(méi)有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
海藻LAMP鑒定試劑盒使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20 次核酸釋放劑試用裝,其使用手冊(cè)可以從本公司網(wǎng)站訂購(gòu)核酸釋放劑。
2. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 海藻 LAMP 陽(yáng)性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。
設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火(復(fù)性)及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等特點(diǎn)。