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技術(shù)文章

人胚胎腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)方法

閱讀:211          發(fā)布時(shí)間:2017-9-5

   腫瘤細(xì)胞為了能夠適用于醫(yī)學(xué)移植,人類胚胎干細(xì)胞(hESCs)需要保持一種“未分化”狀態(tài),即它們沒(méi)有變換成其他類型的細(xì)胞。為了確定培養(yǎng)hESCs的方法能使它們保持未分化狀態(tài),也能生長(zhǎng)、增殖和存活,研究人員經(jīng)常使用動(dòng)物來(lái)源的血細(xì)胞“飼養(yǎng)層”,通常來(lái)自于小鼠(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEFs)。然而,這種方法存在各種污染問(wèn)題,包括病原體和病毒的傳播。
為了避免污染問(wèn)題,使用作為飼養(yǎng)層細(xì)胞,他們發(fā)現(xiàn),MBMCs可以取代動(dòng)物來(lái)源的飼養(yǎng)系統(tǒng),用于培養(yǎng)人類胚胎干細(xì)胞,并能夠使它們成長(zhǎng)在一個(gè)未分化的階段。
研究人員指出:“人類胚胎干細(xì)胞,在一個(gè)未分化階段呈現(xiàn)出不斷的增殖,從而產(chǎn)生無(wú)限數(shù)量的細(xì)胞,這些細(xì)胞可能分化為人體中各種類型細(xì)胞的細(xì)胞。這些特點(diǎn),使得hESCs成為細(xì)胞基礎(chǔ)療法的候選者。”
飼養(yǎng)層是由小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEFs)組成,已經(jīng)被有效地使用了幾十年,但是由于臨床缺點(diǎn),作者在隨后的實(shí)驗(yàn)中使用了細(xì)胞,作為動(dòng)物來(lái)源飼養(yǎng)層細(xì)胞的一個(gè)替代品,不僅用于避免污染問(wèn)題,同時(shí)也因?yàn)楸容^容易獲取。MBMCs沒(méi)有倫理障礙和短缺,也不是很難獲取,與其他人類細(xì)胞一樣,如臍帶血細(xì)胞、成人骨髓細(xì)胞或胎盤細(xì)胞。
研究人員解釋說(shuō):“大姨媽來(lái)源于子宮組織。這些細(xì)胞,在一年當(dāng)中的12個(gè)月都可以從育齡婦女身上獲取。細(xì)胞很容易獲得并具有長(zhǎng)期增殖能力,在臨床上與hESCs來(lái)源的細(xì)胞兼容。”
研究人員發(fā)現(xiàn),使用MBMCs作為hESCs飼養(yǎng)層腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),是無(wú)動(dòng)物源性hESCs培養(yǎng)zui接近和更合適的選擇,也是臨床上細(xì)胞大規(guī)模擴(kuò)張的候選者。他們還發(fā)現(xiàn),在比較生長(zhǎng)因子用于標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)系統(tǒng)和使用hESCs的飼養(yǎng)系統(tǒng)時(shí),生長(zhǎng)因子表達(dá)之間無(wú)顯著差異。
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腫瘤細(xì)胞

 

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