豬口蹄抗體ELISA試劑盒

1. 血清標本收集、處理、保存方法：

用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標本，全血標本室溫放置1－2 h或4℃隔夜，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

2. 血漿標本收集、處理、保存方法：

根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素na或枸緣酸鈉作為抗凝劑，用含抗凝劑的采血guan或離心管采集血液標本，室溫混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清即為血漿。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

3. 尿液標本收集、處理、保存方法：

用干凈容器收集尿液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

4. 唾液標本收集、處理、保存方法：

用干凈離心管收集唾液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

5. 細胞標本收集、處理、保存方法:

（1）細胞培養(yǎng)上清

取細胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

（2）細胞裂解液

收集細胞培養(yǎng)液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，棄去上清，用預(yù)冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細胞。通過反復凍融，使細胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，除去細胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

6. 植物標本收集、處理、保存方法：

取適量大小組織塊（一般0.2－0.5 g），用預(yù)冷的PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）漂洗三次，濾紙拭干水分。準確稱重，放入勻漿管中，加入4倍體積的勻漿介質(zhì)（0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.4 PBS緩沖液）于勻漿管中，冰水浴條件下，剪碎組織塊，手工勻漿或機器勻漿，制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

7. 糞便標本收集、處理、保存方法：

采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中，向離心管中加入適量PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4），攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

豬口蹄抗體ELISA試劑盒

1．ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

1. 靈敏度：有二層含義，1）為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力；2）為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。2. 特異性：常用交叉反應(yīng)率表示。其越高說明特異性越好。

3. 精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV，其值應(yīng)小于15%；定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍

4. 穩(wěn)定性：試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間，一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存，定期測定其靈敏度，特異性和精密度等指標，直到其質(zhì)量指標開始下降為止，通常認為37℃每穩(wěn)定一天相當于4-10℃保存一個半月。

5. 簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性試驗中結(jié)果判斷簡單明了，定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。

6. 安全性：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。

7. 經(jīng)濟性：試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進步降低成本而市場價格比較合理。

試劑評價：需要有的確證方法確證的樣品進行檢測，一般實驗室不易取得此類樣品，每新購進一次試劑評價也很麻煩?？梢酝ㄟ^間接的回收實驗對試劑進行選擇

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