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動物血清的熱滅活非常容易造成蛋白析出增多,若非必要,可以無需做此操作。若必須做動物血清的熱滅活,請嚴(yán)格遵守以下步驟:1、保證血清*融化狀態(tài),溫度接近常溫。2、保證水浴溫度56℃、30分鐘的原則,在水浴...
1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細(xì)胞、正?;驉盒栽錾陌准?xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL...
培養(yǎng)的細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)菌污染怎么判斷?細(xì)菌污染的細(xì)胞過夜培養(yǎng)后,培養(yǎng)基會顯著變黃,培養(yǎng)瓶內(nèi)肉眼可見細(xì)菌沉淀,晃動培養(yǎng)基會有渾濁現(xiàn)象,顯微鏡下觀察細(xì)胞可以看到很細(xì)的沙狀物覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底部。細(xì)胞碎片與污染的分...
DMSO是目前常用的細(xì)胞凍存保護(hù)劑,一般使用時(shí)終濃度控制在5~10%,最佳濃度取決于細(xì)胞類型。一般來說,存活率比較高的細(xì)胞系,培養(yǎng)基、血清、DMSO按照7:2:1的比例新鮮配制使用。細(xì)胞計(jì)數(shù)后,用配制...
細(xì)胞培養(yǎng)瓶使用方法:1.擰開蓋子,用傾斜或者泵打的方式將培養(yǎng)基注入細(xì)胞工廠內(nèi),細(xì)胞懸液緩慢流入細(xì)胞工廠各層中。蓋上蓋子,靜止。2.緩慢將細(xì)胞工廠測立,有加液口的一側(cè)背向自己,靜置使細(xì)胞懸液緩慢均勻流入...
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay,ELISA)于1971年分別由瑞典學(xué)者和荷蘭學(xué)者報(bào)道,開創(chuàng)了運(yùn)用酶標(biāo)記免疫技術(shù)進(jìn)行液體標(biāo)本中微量物質(zhì)測定的實(shí)驗(yàn)方法。其原...
溶液顏色顏色是通過眼、腦和我們的生活經(jīng)驗(yàn)所產(chǎn)生的一種對光的視覺效應(yīng)。人對顏色的感覺不僅僅由光的物理性質(zhì)所決定,比如人類對顏色的感覺往往受到周圍顏色的影響。有時(shí)人們也將物質(zhì)產(chǎn)生不同顏色的物理特性直接稱為...
競爭法一般分為直接競爭法和間接競爭法,這里我們以直接競爭法為例進(jìn)行原理講解。直接競爭法,其基本原理是:將合適濃度的包被抗體包被于微孔板中,加入無關(guān)蛋白載體封閉未結(jié)合位點(diǎn),加入標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)和生物素標(biāo)記...
固相載體在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器,不參與化學(xué)反應(yīng)。可作ELISA中載體的材料很多,*常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學(xué)活性...
細(xì)菌培養(yǎng)是一種用人工方法使細(xì)菌生長繁殖的技術(shù)。細(xì)菌在自然界中分布極廣,數(shù)量大,種類多,它可以造福人類,也可以成為致病的原因。大多數(shù)細(xì)菌可用人工方法培養(yǎng),即將其接種于培養(yǎng)基上,使其生長繁殖。培養(yǎng)出來的細(xì)...
細(xì)胞因子(CK)是由活化免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞(如某些基質(zhì)細(xì)胞)合成分泌的能調(diào)節(jié)細(xì)胞生理功能、參與免疫應(yīng)答和介導(dǎo)炎癥反應(yīng)等多種生物學(xué)效應(yīng)的小分子多肽或糖蛋白,是不同于免疫球蛋白和補(bǔ)體的又一類免疫分子。根...
牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含607個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用。主要成分蛋白質(zhì)——是牛血清中主要成份。除包括可...
“黑膠蟲”可寄生于動物細(xì)胞,也可以生存于培養(yǎng)基中,依靠細(xì)胞和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生,并隨細(xì)胞傳代而傳代??梢姟昂谀z蟲”是一種異養(yǎng)生物。我們在細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑膠蟲后污染怎么辦?下面有幾個(gè)處理建議,我們一起來...
細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細(xì)菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細(xì)胞污染.他們在細(xì)胞培養(yǎng)中污染的特點(diǎn)如下:1、細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根...
細(xì)胞污染的常見原因細(xì)菌細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細(xì)胞生長影響明顯。真菌一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細(xì)胞...
血清沉淀主要是纖維蛋白等蛋白、磷酸鹽、脂類等經(jīng)凍融后析出,導(dǎo)致血清內(nèi)出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象,該現(xiàn)象與血清品質(zhì)無關(guān)。大部分品牌的血清都會有這種情況,不會影響細(xì)胞培養(yǎng),只是培養(yǎng)時(shí)可能偶爾觀察到血清沉淀,注意區(qū)分血清...
純種分離從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學(xué)的研究及應(yīng)用中,不僅需要通過分離純化技術(shù)從混雜的天然微生物群中分離出特定的微生物,而且還必須隨時(shí)注意保持...
總體來講,霉菌的生長受霉菌種類和環(huán)境因素兩方面影響,環(huán)境因素中溫度,濕度,營養(yǎng)和光照比較關(guān)鍵。1、水份。霉菌生長繁殖主要的條件之一是必須保持一定的水份,一般來說,米麥類水份在14%以下,大豆類在11%...
實(shí)驗(yàn)方法原理硫酸銨沉淀法可用于從大量粗制劑中濃縮和部分純化蛋白質(zhì)。用此方法可以將主要的免疫球從樣品中分離,是免疫球蛋白分離的常用方法。高濃度的鹽離子在蛋白質(zhì)溶液中可與蛋白質(zhì)競爭水分子,從而破壞蛋白質(zhì)表...
1、磷酸鹽緩沖液取磷酸二氫鈉38.0g,與磷酸氫二鈉5.04g,加水使成1000mL,即得。2、磷酸鹽緩沖液(pH2.0)甲液:取磷酸16.6mL,加水至1000mL,搖勻。乙液:取磷酸氫二鈉71.6...
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