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　　高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀作為一個(gè)常用的儀器，其基本功能不外乎一個(gè)比色測(cè)定，與比色計(jì)所不同的是在測(cè)定波長(zhǎng)范圍、吸光度范圍、光學(xué)系統(tǒng)、檢測(cè)速度、震板功能、溫度控制、定性和定量測(cè)定軟件功能等方面的差異，當(dāng)然全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)還具有自動(dòng)洗板、溫育、加樣等功能。我們?cè)谶x購(gòu)高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀時(shí)應(yīng)該考慮儀器的濾光系統(tǒng)和測(cè)定波長(zhǎng)參數(shù)：
　　一、濾光系統(tǒng)
　　高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀簡(jiǎn)單的是用濾光方式來(lái)劃分。一般來(lái)說(shuō)，可以分為濾光片型和光柵型兩大類。也有一些高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀里面同時(shí)裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測(cè)，本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起，并沒(méi)有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
　　光柵型濾光系統(tǒng)具有使用方便，可以進(jìn)行光譜掃描，靈活性等優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)然，濾光片系統(tǒng)也有其顯著的優(yōu)勢(shì)，例如價(jià)格較為便宜，檢測(cè)靈敏度高，帶寬的可選擇性，可以進(jìn)行快速的濾光片切換，可配備有自動(dòng)加樣系統(tǒng)，在化學(xué)發(fā)光檢測(cè)中光線的透過(guò)率高。
　　目前，濾光片系統(tǒng)應(yīng)用更廣，因?yàn)樗梢宰寣?shí)驗(yàn)者完成更多的試驗(yàn)。
　　二、測(cè)定波長(zhǎng)
　　一般高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀的測(cè)定波長(zhǎng)在400～750nm或800nm之間，*可以滿足ELISA的顯色測(cè)定。目前國(guó)內(nèi)常見(jiàn)的ELISA試劑盒所使用的標(biāo)記用酶均為辣根過(guò)氧化物酶(HRP)，底物通常為四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)，其在過(guò)氧化氫溶液的存在下，經(jīng)HRP作用，分別氧化為2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和聯(lián)苯醌。當(dāng)pH值為5．0左右時(shí)，DAB在450nm波長(zhǎng)處有大吸收，當(dāng)pH值降為L(zhǎng)0時(shí)，大吸收波長(zhǎng)移至492nm，同時(shí)摩爾消光系數(shù)變大，顯色加深，因而常用強(qiáng)酸如硫酸或鹽酸終止反應(yīng)。TMB的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌在波長(zhǎng)450nm處有大消光系數(shù)，如果HRP量少，H：O：和TMB過(guò)量時(shí)，則形成藍(lán)色的陽(yáng)離子根。降低pH，即可使藍(lán)色的陽(yáng)離子根轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌，使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min。因此，450nm和492nm兩個(gè)波長(zhǎng)是目前ELISA測(cè)定常用的。各種高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動(dòng)轉(zhuǎn)換的部件，可以同時(shí)安裝6～8片濾光片，所配備的濾光片均應(yīng)包括上述兩個(gè)波長(zhǎng)，有的高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀以490nm濾光片替代492nm濾光片，影響不大。除了這兩個(gè)基本濾光片外，考慮到雙波長(zhǎng)比色的需要，還應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長(zhǎng)的濾光片，其他濾光片可根據(jù)自己的需要選擇。有時(shí)，有的實(shí)驗(yàn)室希望用高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀作微量生化測(cè)定，故高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀生產(chǎn)廠家對(duì)其生產(chǎn)的高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀擴(kuò)展了紫外檢測(cè)功能，此時(shí)需要一個(gè)340nm波長(zhǎng)濾光片。此時(shí)，高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀的測(cè)定波長(zhǎng)范圍就成為340—750nm或800nm。
　　高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀有單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)檢測(cè)功能。有時(shí)使用者不知在什么情況下使用單或雙波長(zhǎng)檢測(cè)。所謂的“單波長(zhǎng)”就是使用一種對(duì)顯色具大吸收的波長(zhǎng)即450nm或492nm進(jìn)行比色測(cè)定；而“雙波長(zhǎng)”則除了用對(duì)顯色具大吸收的波長(zhǎng)即450nm或492nm進(jìn)行比色測(cè)定外，同時(shí)用對(duì)特異顯色不敏感的波長(zhǎng)如630nm進(jìn)行測(cè)定，高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀后打印出來(lái)的吸光度則為二者之差。630nm波長(zhǎng)下得到的吸光度是非特異的，來(lái)自于板孔上諸如指紋、灰塵、臟物等所致的吸收。因此，在ELISA比色測(cè)定中，好使用雙波長(zhǎng)，且不必設(shè)空白孔。