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L-02人正常肝細(xì)胞特點(diǎn)及傳代說明

2016-7-1  閱讀(3366)

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     L-02人正常肝細(xì)胞特點(diǎn):
    1. 特異性強(qiáng):只對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行有效識別和殺滅,而不傷害正常組織和細(xì)胞,抗瘤譜廣。
    2. 對體內(nèi)各種腫瘤細(xì)胞均能有效治療。
    3.安全性好,除可能出現(xiàn)的發(fā)熱、少量出血外,無其他不良反應(yīng)
    4.本產(chǎn)品具有良好的增殖和分化潛能,可分化為骨細(xì)胞,脂肪細(xì)胞,軟骨細(xì)胞等,流式檢測結(jié)果顯示,CD29,CD44,CD105陽性,CD35,CD45陽性
    L-02人正常肝細(xì)胞增殖及傳代說明:
    (一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
    (二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),具體步驟如下:
    1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
    2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
    3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。
    細(xì)胞經(jīng)過嚴(yán)格的控制(從組織來源、實(shí)驗(yàn)室條件等方面),人正常肝細(xì)胞;L-02純度可達(dá)98%。不同的細(xì)胞傳代次數(shù)不一。多數(shù)細(xì)胞種類是從胚胎提取,于原代(或二代)凍存在液氮中。細(xì)胞采用干冰運(yùn)輸,客戶收到細(xì)胞后,從干冰中取出放入液氮中保存,待實(shí)驗(yàn)安排好后,解凍后即可以進(jìn)行復(fù)蘇培養(yǎng)。公司實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞、培養(yǎng)基都是經(jīng)過嚴(yán)格檢驗(yàn),分離、配制而成,產(chǎn)品質(zhì)量過硬。
    運(yùn)輸與保存:本品使用10%DMSO凍存液冷凍,采用干冰保存運(yùn)輸,收到細(xì)胞后,如果不立即復(fù)蘇,請將細(xì)胞放入液L-02人正常肝細(xì)胞;L-02復(fù)蘇方法:取出凍存管后,投入37 ℃水浴中,震蕩解凍2 min,酒精消毒管壁外側(cè)后,將其轉(zhuǎn)入超凈臺中,將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中,加入5 ml 37 ℃預(yù)熱的培養(yǎng)基,并清洗凍存管一次,將離心管離心(1000 rpm,5 min),棄去上清液,再加入2 ml培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
    注意事項:(1) 本產(chǎn)品只供科研使用,不可應(yīng)用于臨床;(2) 嚴(yán)格無菌操作。

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