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BioGems重組人胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白—細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)添加
閱讀：3146發(fā)布時(shí)間：2017-12-18
BioGems無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)添加物—轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素
白蛋白、胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白等是無(wú)血清培養(yǎng)體系中細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的因子。
Biogems的人重組轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素生物活性與天然蛋白相同，批間穩(wěn)定。這些蛋白由真核細(xì)胞重組表達(dá)，不含動(dòng)物成分。質(zhì)控嚴(yán)格，zui大程度地降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。
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一 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)中的作用
二 重組和提取的胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白的區(qū)別
三 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)基中的使用濃度
一 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)中的作用
胰島素在無(wú)血清培養(yǎng)基中的作用
無(wú)血清或低血清培養(yǎng)基中，胰島素為必加組分，這是由胰島素對(duì)細(xì)胞的重要作用決定的。
我們都知道，胰島素在體內(nèi)zui主要的功能是調(diào)節(jié)機(jī)體血糖水平。其實(shí)胰島素的作用非常
廣泛，包括調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)和脂肪的代謝，以及促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)等。
轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)基中的作用
轉(zhuǎn)鐵蛋白是通用的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)劑，其可通過(guò)幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)對(duì)鐵的攝取量而維持細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)，
進(jìn)而有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。
牛血清中含有牛種屬的轉(zhuǎn)鐵蛋白，由于轉(zhuǎn)鐵蛋白的保守性，牛轉(zhuǎn)鐵蛋白可對(duì)人和動(dòng)物
細(xì)胞起到很好地保護(hù)和支持作用，因此培養(yǎng)基中通常要加入牛血清從而組成*培養(yǎng)基。無(wú)
血清培養(yǎng)基為達(dá)到與含血清培養(yǎng)基相同或相似的細(xì)胞培養(yǎng)性能，其中也必須添加轉(zhuǎn)鐵蛋白，
以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞鐵離子平衡的調(diào)節(jié)，以及對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的維持。
二 無(wú)血清培養(yǎng)基中應(yīng)該添加提取的胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白，還是重組的胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白?
人胰島素的來(lái)源有限，無(wú)法滿足臨床和科研的需求，因此人們通常從?；蜇i的胰臟中提取獲得胰島素。
人血漿中轉(zhuǎn)鐵蛋白的含量豐富，約為 25mg/ml，占血漿總蛋白的 4%，而且轉(zhuǎn)鐵蛋白的種屬間交叉活性比較強(qiáng)，所以轉(zhuǎn)鐵蛋白多從人或牛的血漿中提取而得。
胰島素種屬間高度保守，豬和牛的胰島素與人的胰島素氨基酸序列上分別僅有 1 個(gè)和 3
個(gè)氨基酸的差異，所以豬和牛的胰島素*可以替代人的胰島素來(lái)進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)和臨床治療。然而，畢竟豬和牛的胰島素屬異種蛋白，進(jìn)入人體后容易產(chǎn)生抗體，影響治療效果，并引起副反應(yīng)。所以，目前臨床上廣泛應(yīng)用的是重組人胰島素，即使用基因工程手段，將人的胰島素基因轉(zhuǎn)移到細(xì)菌或者酵母細(xì)胞中，然后利用發(fā)酵工藝，進(jìn)行大規(guī)模的生產(chǎn)，從而得到大量、高純度的人胰島素。
同樣的，提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白具有安全性差和批間差大等缺陷。尤其是將提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白添加于用于細(xì)胞治療的無(wú)血清培養(yǎng)基中時(shí)，可能會(huì)將人或動(dòng)物的病原體(如瘋牛病病毒，克雅氏病毒和其它未知病原體)藉回輸人體的細(xì)胞而帶入人體，從而發(fā)生非預(yù)期的疾病。而重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白，則可*避免人或動(dòng)物病原體污染的可能性，因此更適合用于配制細(xì)胞治療用的無(wú)血清培養(yǎng)基。
三 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)基中的使用濃度
胰島素
所培養(yǎng)的細(xì)胞不同，無(wú)血清培養(yǎng)基中所需的胰島素量也有所區(qū)別，一般在 1-10mg/L之間。
轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)基中的使用濃度
轉(zhuǎn)鐵蛋白
同樣的，細(xì)胞種類不同，對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白的需求量也不同，下表謹(jǐn)供參考。具體的濃度還是要根據(jù)細(xì)胞的種類、狀態(tài)和想要實(shí)現(xiàn)的功能來(lái)通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定。
表 4：轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中的添加濃度
| 原代細(xì)胞 | CHO(中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞) | 雜交瘤和 Vero 細(xì)胞 |
轉(zhuǎn)鐵蛋白工作濃度 | 5 -100mg/L | 10 - 50mg/L | 5mg - 20mg/L |
資料來(lái)源：BioGems
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