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一種簡(jiǎn)單實(shí)用的細(xì)胞凍存方法
閱讀：1850 發(fā)布時(shí)間：2016-12-20
一種簡(jiǎn)單實(shí)用的細(xì)胞凍存方法
我們實(shí)驗(yàn)室一直用一種特簡(jiǎn)單但非常安全的細(xì)胞凍存方法，與大家共享：
凍存液：一般用10%DMSO(推薦用sigema原裝的，質(zhì)量好不用預(yù)消毒)+10％血清的*培養(yǎng)基，如果細(xì)胞珍貴的話(huà)用10％DMSO＋90％全血清
降溫方法：用zui少兩厘米厚的醫(yī)用棉紗將凍存管緊緊包裹，扎緊，直接放入-70度冰箱，隔夜取出凍存管直接放液氮凍存。
復(fù)蘇效果對(duì)比：細(xì)胞凍存2周后復(fù)蘇，本方法凍存的細(xì)胞與使用程序性降溫儀凍存的細(xì)胞復(fù)蘇效果相差不大，但明顯比傳統(tǒng)4度、-20度、-70度的方法要好，傳統(tǒng)的凍存方法不但費(fèi)時(shí)費(fèi)力，而且各時(shí)間段的放置時(shí)間并無(wú)嚴(yán)格統(tǒng)一，尤其在4度和-20度時(shí)間不好掌握。
要點(diǎn)：面紗包裹一定要足夠厚，細(xì)胞用凍存液重懸后不要在常溫放置太長(zhǎng)時(shí)間。從-70度取細(xì)胞的時(shí)間無(wú)嚴(yán)格控制，我們?cè)?jīng)放過(guò)一個(gè)星期后在入液氮，同樣可以順利復(fù)蘇。
不知是否有人發(fā)過(guò)，給沒(méi)有嘗試過(guò)的戰(zhàn)友試一下，我們從國(guó)外購(gòu)買(mǎi)的5000元一支的細(xì)胞一直用著方法凍存。