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ELISA實(shí)驗(yàn)背景過高的主要原因有哪些呢?

閱讀:2642      發(fā)布時(shí)間:2019-2-15
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 在實(shí)驗(yàn)過程中往往會(huì)有不盡人意的地方,比如說ELISA實(shí)驗(yàn)背景過高,那么 造成ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)背景過高的主要原因有哪些呢?
1、不正確的洗滌

  洗滌不充分或省略洗滌步驟中的任何一步均會(huì)導(dǎo)致背景色過高。

 解決方法:檢查洗滌緩沖液的體積并確保完成所有的洗滌步驟;確保洗滌緩沖液的正確稀釋和正確使用。

 2、底物污染

  確保在使用前,底物不被金屬離子或氧化劑污染;在實(shí)驗(yàn)時(shí)留存一些額外的底物,底物本身不應(yīng)該有顏色。

3、底物曝光

  底物曝光會(huì)使底物變成藍(lán)色,因此在加入板內(nèi)之前要保存在暗處(即試劑瓶?jī)?nèi))。

4、HRP的錯(cuò)誤稀釋

  HRP濃度過高會(huì)造成高背景色,因此要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書稀釋。

 5、錯(cuò)誤的孵育時(shí)間和溫度

 必須嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書來定孵育時(shí)間和溫度。

 6、包被板保存不當(dāng)

  如果包被板只用了一部分,一定要正確保存剩余的板條。

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