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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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厭氧培養(yǎng)系列
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染液
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
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兔ELISA試劑盒的原理是怎樣的?

時(shí)間:2016/5/26閱讀:2064
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    一般細(xì)胞因子的檢測(cè),都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測(cè),由于因子分子量比力大,一般10幾個(gè)KD左右,很容易找到兩個(gè)或多個(gè)抗原表位。而小分子很難找到兩個(gè)不通的表位,也就決定了包被抗體和檢測(cè)抗體無(wú)法同時(shí)結(jié)合小分子并固相化。解決方案便是酶標(biāo)板上包被二抗,每個(gè)孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子,然后加樣品,再加不帶標(biāo)志的檢測(cè)抗體,顯色底物。樣品的目標(biāo)小分子的含量越高,吸光度越低。病原體抗原的定性與定量,評(píng)估自己制備的血清抗體的效價(jià)等。
   
    兔ELISA試劑盒中封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。蛋白和非離子型去污劑。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會(huì)增加背景噪音,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。兔ELISA試劑盒如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。切勿使用過(guò)多的檢測(cè)試劑。如果濃度過(guò)高,或者未正確稀釋?zhuān)瑒t會(huì)導(dǎo)致高背景。固相載體表面有能被此蛋白質(zhì)*覆蓋,兔ELISA試劑盒其后加入的血清標(biāo)本和酶結(jié)合物,其中的蛋白質(zhì)也會(huì)部分地吸附于固相載體表面,zui后產(chǎn)生非特異性顯色而導(dǎo)致本底偏高。

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