總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
     鐵是人體必需微量元素，總含量約為3270mg。鐵分布較廣，有67.6%的鐵作為血紅蛋白分子的輔基分布于血紅蛋白中，參不鐵的運(yùn)輸；骨骼和肌紅蛋白中各存在2.59%和4.15%，儲(chǔ)存鐵約占25.37%血清中鐵均以三價(jià)鐵離子形式不轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合，因此測(cè)定血清鐵時(shí)，首先需要Fe不轉(zhuǎn)鐵蛋白分離?？傝F結(jié)合力(TIBC)是指血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白能不鐵結(jié)合的總量
     Jisskang總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)是采用分光光度法以亞鐵嗪為底物進(jìn)行總鐵結(jié)合力的檢測(cè)。是將過(guò)量的鐵加入待測(cè)血清、血漿中，使鐵不多余的轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合，游離鐵被鐵吸附劑吸附除去。在酸性介質(zhì)中不轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的血清鐵從轉(zhuǎn)鐵蛋白中解離出來(lái)，再被還原劑還原為Fe,后者不亞鐵嗪生成紫紅色化合物，通過(guò)分光光度計(jì)檢測(cè)2+562nm處吸光度值，適用于檢測(cè)血清、血漿樣品中的總鐵含量，即為總鐵結(jié)合力(TIBC)。上述檢測(cè)方法屬于直接檢測(cè)法，應(yīng)設(shè)血清空白，糾正血清本身的色度，根據(jù)公式計(jì)算出鐵含量。該檢測(cè)試劑盒在 140μmol/L 以下線性關(guān)系良好，甘油三脂≤3.39mmol/L，膽紅素≤171μmol/L，對(duì)本法基本無(wú)干擾。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成：
 總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法) 產(chǎn)品組成      50T     Storage
試劑(A):鐵標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)    3ml    4℃避光
試劑(B):TIBC鐵標(biāo)準(zhǔn)稀釋液    30ml    RT
試劑(C): TIBC Assay buffer    60ml    4℃
試劑(D):亞鐵嗪顯色液    3ml    4℃避光
試劑(E): ddH2O    10ml    RT
試劑(G):鐵吸附劑    3g    RT
使用說(shuō)明書(shū)             1份
自備材料：
1、離心管或試管
2、比色杯
3、分光光度計(jì)
總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)操作步驟(僅供參考)：
1、制備處理樣品鐵溶液和鐵標(biāo)準(zhǔn)工作液：取適量鐵標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)，按鐵標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)：TIBC鐵標(biāo)準(zhǔn)稀釋液=1:9 的比例配制鐵標(biāo)準(zhǔn)(10μg/ml)，作為處理樣品鐵溶液；同時(shí)按鐵標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)：TIBC鐵標(biāo)準(zhǔn)稀釋液=1:49 的比例配制鐵標(biāo)準(zhǔn)(2μg/ml)，作為鐵標(biāo)準(zhǔn)工作液。4℃避光保存3個(gè)月有效。
2、制備樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備，可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，-20℃凍存，用于TIBC的檢測(cè)。選用經(jīng)稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥有塞子的試管或者一次性無(wú)菌聚乙烯有蓋子的離心管，加入血清或血漿0.45ml、鐵標(biāo)準(zhǔn) (10μg/ml)0.25ml、ddH2O 0.2ml，充分混勻，室溫放置10min。加入鐵吸附劑50mg，混勻，室溫放置10min，期間振蕩4次，3000g離心10min，取上清液，待用。
3、TIBC檢測(cè)：選用經(jīng)稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥的試管或者一次性無(wú)菌聚乙烯的離心管，按下表操作。

加入物(ml)    空白管    標(biāo)準(zhǔn)管    測(cè)定管
ddH2O    0.45    —    —
鐵標(biāo)準(zhǔn)(2μg/ml)    —    0.45    —
上清液    —    —    0.45
TIBC Assay buffer    1.2    1.2    1.2
混勻，于562nm處，以空白管調(diào)零，讀取測(cè)定管吸光度(即血清空白)。
亞鐵嗪顯色液    0.05    0.05    0.05

4、混勻，室溫靜置15min或37℃孵育10min，分光光度計(jì)562nm處檢測(cè)，以空白管調(diào)零，比色杯光徑0.5cm，再次讀取各管吸光度，1h內(nèi)比色完畢。
計(jì)算：
血漿、血清總鐵結(jié)合力(TIBC)(μmol/L)={(A測(cè)定−A血清空白×0.97)/A標(biāo)準(zhǔn)}×71.6
式中：A 測(cè)定=測(cè)定孔加入亞鐵嗪顯色液后測(cè)得的吸光度值
    A血清空白=測(cè)定孔未加入亞鐵嗪顯色液前測(cè)得的吸光度值
    A標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)孔的吸光度值
    單位換算：鐵標(biāo)準(zhǔn)(2μg/ml)=鐵標(biāo)準(zhǔn)(35.8μmol/L)
             μg/dl=μmol/L/0.179
    血漿、血清未飽和鐵結(jié)合力(UIBC)(μmol/L)=TIBC含量－血清鐵含量
參考區(qū)間：成年健康人血清總鐵結(jié)合力：
                                   男性：50~77μmol/L(280~430μg/dl)
                                   女性：54~77μmol/L(300~430μg/dl)
總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)注意事項(xiàng)：
1、溶血樣本對(duì)檢測(cè)有干擾，盡量避免采用溶血樣本。
2、如果樣品濃度過(guò)高，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè)，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
3、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中用到的水，不可用普通的蒸餾水，盡量采用高純度的去離子水。
4、玻璃器材需要10%的鹽酸浸泡 24h，取出后用去離子水沖洗后才可以使用。
5、避免不鐵器接觸，以防鐵污染。
6、標(biāo)準(zhǔn)品呈色24h 穩(wěn)定，血清呈色 30min內(nèi)穩(wěn)定。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，顏色會(huì)慢慢加深，應(yīng)在1h內(nèi)比色完畢。
7、0.97是體積校正值。
8、該法批內(nèi)差異CV≤3.1%；批間差異CV≤2.6%。
有效期：6個(gè)月

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