五月婷网站,av先锋丝袜天堂,看全色黄大色大片免费久久怂,中国人免费观看的视频在线,亚洲国产日本,毛片96视频免费观看

您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

| 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

17321152016

technology

首頁   >>   技術(shù)文章   >>   細(xì)胞傳代培養(yǎng)的流程和注意事項(xiàng)

上海喆圖科學(xué)儀器有限公司

立即詢價(jià)

您提交后,專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)的流程和注意事項(xiàng)

閱讀:768      發(fā)布時(shí)間:2024-4-8
分享:

細(xì)胞傳代培養(yǎng)的流程和注意事項(xiàng)如下:
1、當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到其生長密度高處時(shí)(一般腫瘤細(xì)胞為80-100%,原代細(xì)胞和干細(xì)胞為80-90%,有些細(xì)胞為40-50%,熟知所養(yǎng)細(xì)胞的生長密度極限),移除舊培養(yǎng)液;
2、用PBS洗滌兩次(舊培養(yǎng)中的鈣離子會(huì)抑制胰酶的活性),加入1ml胰酶消化液(以T25培養(yǎng)瓶為例),立即蓋好蓋子,把培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下觀察,如大部分細(xì)胞變圓,立即移除胰酶消化液(如大部分細(xì)胞漂起,可不移除胰酶消化液),加入5ml預(yù)熱培養(yǎng)基,用吸管取培養(yǎng)液吹打瓶壁細(xì)胞,使其脫離瓶壁形成單細(xì)胞懸液,離心,小心移除上清;
3、加入5ml預(yù)熱培養(yǎng)基,吹打重懸細(xì)胞用細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下計(jì)算細(xì)胞數(shù),分裝入T25培養(yǎng)瓶中,添加基至總體積為5ml,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng);傳代1次。

注意事項(xiàng):
1.熟知所養(yǎng)細(xì)胞的生長密度高處;
2.第一次進(jìn)行所養(yǎng)細(xì)胞傳代時(shí),消化時(shí)必須把培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下觀察,并記錄所需時(shí)間,下次按照該時(shí)間執(zhí)行即可;
3.進(jìn)行細(xì)胞傳代時(shí)必須結(jié)合考慮細(xì)胞生長密度需求(啟動(dòng)正常生長所需的密度)和實(shí)際的工作需求,在滿足細(xì)胞生長密度需求的前提下,需要多少瓶就傳多少瓶,降低工作強(qiáng)度和試劑耗材消耗;
4.離心速度和時(shí)間依據(jù)具體細(xì)胞決定。


會(huì)員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
在線留言