產(chǎn)品名稱:SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞)
貨號 :SX-C0482
培養(yǎng)基 :"*培養(yǎng)基有售,用我們拜力生物的*培養(yǎng)基,細胞培養(yǎng)更省心!"
規(guī)格 :5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
供應商 :拜力生物
貨期 :7-10天
SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞)實驗事項:
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。
洗板方法
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。
2. 自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算
以標準物的濃度為縱坐標(對數(shù)坐標),OD值為橫坐標(對數(shù)坐標),在對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線。用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
◇ 注意事項:
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分標本需添加抑肽酶。
◇ 液體類標本
標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。
◇ 血漿:
應根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。
◇ 尿液、胸腹水、腦脊液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。
人肝癌細胞株
簡介: 本公司是細胞培養(yǎng)提供者是優(yōu)質的atcc細胞,atcc傳代細胞,sciencell細胞,sciencell原代細胞供應商,提供細胞培養(yǎng),細胞培養(yǎng)技術,原代細胞培養(yǎng),動物細胞培養(yǎng),植物細胞培養(yǎng)相關產(chǎn)品,主要經(jīng)營品牌有atcc、gibco、abcam等,其中以人肝癌細胞株產(chǎn)品zui為熱銷,歡迎新老客戶X細胞。
詳細說明:
來源背景說明:美國菌種保藏中心, 又稱美國模式菌種收集中心(ATCC),是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的,非贏利性組織。 目前它可以提供各種動植物細胞、標準品、菌株達兩萬多種。ATCC的成立可追溯到1925年,一個科學委員會認識到科學研究對于微生物的大量需求而萌發(fā)了創(chuàng)建一個微生物相關制品供應中心的想法。
細胞培養(yǎng)相關知識:在細胞凍存時加入溫保護劑,能大大提高凍存效果。常用的低溫保護劑是DMSO,它是一種滲透性保護劑,可迅速透入細胞,提高胞膜對水的通透性,降低冰點,延緩凍結過程,能使細胞內水分在凍結前透出細胞外,在胞外形成冰晶,減少胞內冰晶,從而減少冰晶對細胞的損傷。x細胞細胞的凍存:先將凍存管放入 4℃冰箱,約40min。接著置于-20℃冰箱,約30-60min。再接著置于-80 超低溫冰箱中放置一夜。置于液氮罐中長期保存。同時做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄??傊畑細胞的復蘇: 應遵守慢凍快融的原則。
◇聲明:
本公司所有細胞入庫之前均經(jīng)過嚴格的細胞質量檢測和鑒定,所有細胞在出庫之前均經(jīng)過一次嚴 格的質檢認證,確保細胞到每一位用戶手里都是狀態(tài)。公司匯集了一批專業(yè)的細胞生物學技術 人員,以*的技術支撐產(chǎn)品,歡迎廣大用戶選購。