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17-0180-02- DEAE Sephadex A-50
  • 17-0180-02- DEAE Sephadex A-50

貨物所在地:北京北京市

更新時間:2025-02-22 21:00:08

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(一) 原理

DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)為弱堿性陰離子交換劑。用NaOH將CL-型轉(zhuǎn)變?yōu)?OH型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白屬于中性蛋白(等電點為PH6.85~7.5),其余均屬酸性蛋白。在PH7.2~7.4的環(huán)境中,酸性蛋白均被DEAE-Sephadex A-50吸附,只有γ球蛋白不被吸附。因此,通過柱層析γ球蛋白便可在洗脫中先流出,而其他蛋白

DEAE-Sephadex A-50

柱層析純化免疫球蛋白原理

 

DEAE-sephadexA-50

柱層析是離子交換層析的一種。

(四) 注意事項

1.柱的選擇:從理論上說,只要柱足夠長,就得獲得理想的分辨率,但由于層析柱流速同壓力梯度有關(guān),柱長增加使流速減慢,峰變寬,分辨率降低。柱的直徑增加,使液體流動的不均勻性增加,分辨率明顯下降。

2.純化過程必須嚴格控制脫緩沖液的PH及離子強度。樣品與A-50凝膠必須用洗脫緩沖液*平衡后,才能進行柱層析。

3.所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。

4.洗脫過程中應(yīng)嚴格控制流速,且勿過快。

5.上樣的體積要小,濃度不宜過高。

6.加樣及整個洗脫過程中,嚴防柱面變干。

 

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