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Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒

Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒操作說(shuō)明： 
一．微孔酶標(biāo)儀法
1.  *溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，取10ul，稀釋250ul ，使終濃度為0.2mg/ml。待測(cè)蛋白樣品在什么溶液中，標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡(jiǎn)便起見(jiàn)，也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 5×G250染色液使用前請(qǐng)顛倒3-5次混勻，取1ml 5×G250染色液，加入4ml雙蒸水，混勻成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3.  將標(biāo)準(zhǔn)品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分別加到96孔板中，加PBS稀釋液補(bǔ)足到20微升。
4.  將樣品作適當(dāng)稀釋?zhuān)ê枚嘧鰩讉€(gè)梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋?zhuān)?，?0微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時(shí)的誤差，標(biāo)準(zhǔn)線(xiàn)前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確，所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線(xiàn)1/2后。
5.  各孔加入200微升稀釋后的1×G250染色液，室溫放置3-5分鐘。
6.  用酶標(biāo)儀測(cè)定A595，或560-610nm之間的其它波長(zhǎng)的吸光度。
7.  根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。