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細(xì)胞培養(yǎng)試劑凋亡檢測(cè)試劑盒ANNEXIN V-FITC/PI

貨號(hào) ：CA1020
規(guī)格 ：20T/50T/100T
保存 ：貯存于 2-8°C，復(fù)檢期為一年。建議 Annexin V-FITC 打開(kāi)后，分裝成小份凍存于-20°C。

產(chǎn)品說(shuō)明 ：
    細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。 Annexin V 是一種分子量為 35.8 KD 的 Ca 2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白， 能與細(xì)胞凋亡過(guò)程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine, PS）高親和力特異結(jié)合。FITC-Annexin V 結(jié)合到凋亡細(xì)胞后，在藍(lán)色光的激發(fā)下，發(fā)出綠色熒光，區(qū)分出凋亡細(xì)胞與正常細(xì)胞。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）是一種核酸染料，
    它不能穿透完整細(xì)胞膜，但對(duì)凋亡晚期細(xì)胞和死細(xì)胞的破損細(xì)胞膜能夠穿透，并使細(xì)胞核紅染。將FITC-Annexin V 與 PI 匹配使用，可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。
 

操作步驟:

1. 調(diào)整待測(cè)細(xì)胞的濃度為 5×10 5 -1×10 6 個(gè)/ml。
2. 取 1ml 細(xì)胞，1000rpm，4℃離心 10 分鐘，棄上清。
3. 加入 1ml 預(yù)冷的 PBS，輕輕震蕩使細(xì)胞懸浮，1000rpm，4℃離心 10 分鐘，棄上清（對(duì)于貼壁細(xì)胞，先用胰酶消化，再用 PBS 洗滌） 。
4. 重復(fù)步驟 3 兩次。
5. 將細(xì)胞重懸于 200µl Binding Buffer。
6. 加入 10µl Annexin V-FITC 和 10µl PI，輕輕混勻，避光室溫反應(yīng) 15 分鐘 或 4℃反應(yīng) 30 分鐘。
7. 加入 300µl Binding Buffer，在 1 小時(shí)內(nèi)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
8. 若用熒光顯微鏡檢測(cè)，將細(xì)胞混合液離心，取細(xì)胞沉淀涂片，再進(jìn)行觀察。

注意事項(xiàng):
    為保證得到理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果在使用此試劑盒之前請(qǐng)認(rèn)真閱讀該注意事項(xiàng)。
    1.旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
    2.Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物質(zhì)，在保存與操作時(shí)請(qǐng)注意避光。
    3.Propidium iodide（PI）能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用。
    4.在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免 PBS 殘留影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
    5.PI 染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議行 Annexin V-FITC 染色，上機(jī)前 5 分鐘再加入 PI 染色。

    6.整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在 4℃下操作。
    7.反應(yīng)完畢后請(qǐng)盡快檢測(cè)，因?yàn)榧?xì)胞凋亡是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過(guò)程，反應(yīng) 1 小時(shí)后熒光強(qiáng)度就開(kāi)始衰變。
    8.成功的檢測(cè)凋亡受以下幾種因素的影響，如細(xì)胞類型、細(xì)胞膜上 PS 的密度、發(fā)生凋亡時(shí) PS 翻轉(zhuǎn)的比例、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的方法、所用試劑、誘導(dǎo)凋亡的時(shí)間等，把這些影響因素進(jìn)行優(yōu)化對(duì)實(shí)驗(yàn)成功是非常必要的。
     此試劑盒僅供科研使用。

相關(guān)產(chǎn)品 ：

P1020 1×PBS ， PH7.2-7.4 ， 0.01M
T1300 胰蛋白酶－ EDTA 消化液 (0.25%) 不含酚紅
T1350 胰蛋白酶消化液 (0.25%) 不含酚紅
24800 通用細(xì)胞凍存液
12100  DMEM(H)
31800  RPMI Medium 1640
CA1040 一步法 TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 (FITC)
S1056 細(xì)胞凋亡熒光 Hoechst 33342-PI 雙染試劑盒

細(xì)胞培養(yǎng)試劑凋亡檢測(cè)試劑盒ANNEXIN V-FITC/PI訂購(gòu)說(shuō)明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

細(xì)胞培養(yǎng)試劑凋亡檢測(cè)試劑盒ANNEXIN V-FITC/PI運(yùn)輸說(shuō)明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。