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高效液相色譜儀 主要有 3 類:正相 高效液相色譜儀、反相高效液相色譜儀和超高效液相色譜儀。
正相高效液相色譜儀使用非極性溶劑作為流動相,硅膠顆粒作為固定相。在常規(guī)高效液相色譜儀中,與非極性化合物相比,極性化合物在固定相中會更長時間地粘附在極性有機硅上。因此,非極性化合物在正常高效液相色譜儀中的洗脫速度更快??讖揭话阍?微米左右。
反相高效液相色譜儀是最常見的高效液相色譜儀類型。在反相高效液相色譜儀中,固定相被烴鏈(通常長8-18個碳)改性,導致色譜柱變?yōu)榉菢O性。也使用極性溶劑。在反相高效液相色譜儀中,樣品中的極性分子會與溶劑產(chǎn)生強烈的吸引力,從而使它們更快地洗脫。它們也不會與非極性固定相相互作用。非極性化合物會與固定相產(chǎn)生范德華力和分散相互作用,因此它們的洗脫速度較慢。
與高效液相色譜儀相比,超高效液相色譜儀運行速度更快、使用的溶劑更少且分辨率更高。色譜柱也更小,固定相顆粒的尺寸要小得多。較小的孔(亞2微米)促進了分子更好的分離和分辨率。較短的色譜柱還可以進行快速檢測。然而,超高效液相色譜儀 不能用于干燥或未過濾的樣品,因為較小的孔會堵塞,這是一個昂貴且耗時的修復過程。
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