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在使用液相色譜儀時,通常會有在線脫氣這一步,那你知道為什么嗎?一起來看看!
在線脫氣即是儀器運(yùn)行過程中,由脫氣泵對流動相進(jìn)行脫氣處理。
在液相色譜對有機(jī)物分析過程,由于有機(jī)物在各類型色譜柱中保留特性的不同,我們需要使用不同比例的流動相作為洗脫劑對樣品進(jìn)行分離洗脫,從而達(dá)到化合物的分離和純化。
一般來說,液相色譜使用的各種流動相液體中都會含有不同溶解量的氣體,當(dāng)溫度升高、劇烈震動、壓力下降等情況下容易產(chǎn)生氣泡;另外還有一種情況是,當(dāng)兩種不同的溶劑混合時,熱力學(xué)體積發(fā)生變化,會引起氣泡的產(chǎn)生,尤其在梯度變化過程中;此外,在單泵使用中,常常需要甲醇與水的切換使用,在吸濾頭表面往往會有較多的氣泡溢出。
由于氣體的可壓縮性,在氣泡進(jìn)入到泵內(nèi),而滯留情況下,會導(dǎo)致系統(tǒng)壓力波動和流速不穩(wěn);同時,當(dāng)氣泡進(jìn)入色譜柱時,引起所分析的樣品與色譜柱填料作用位點(diǎn)減少,故而使樣品保留時間等產(chǎn)生影響;氣泡進(jìn)入檢測器會使譜圖出現(xiàn)鬼峰和雜峰、基線漂移等,影響測定結(jié)果;此外,系統(tǒng)中的氣體尤其是氧氣會與色譜柱某些填料反應(yīng),引起柱效降低,使色譜柱使用壽命縮短,因此,在線脫氣對于液相色譜來說十分重要。
那該如何避免氣泡所產(chǎn)生的這些影響呢?除上述所說的在線脫氣外,在有條件的情況下,我們可以對含水溶液進(jìn)行超聲脫氣處理,一般超聲5-10 min即可;還有在實驗過程中,避免環(huán)境溫度產(chǎn)生較大的變化,定期清洗流動相吸濾頭或者更換。
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