詳細(xì)介紹
T載體 pSC-T說明
SinoBio pSC-T(Simple Cloning T-Vector)是一種PCR產(chǎn)物高效TA克隆的T載體,它由pUC18載體改造而成。在PCR克隆構(gòu)建過程中,為了進(jìn)一步的克隆步驟,常會(huì)在PCR產(chǎn)物的兩端引入專門的酶切位點(diǎn),如T載體上已帶有相同的酶切位點(diǎn),會(huì)對下一步的酶切連接帶來不利的影響。為消除多克隆酶切位點(diǎn)帶來的負(fù)作用,SinoBio Simple Cloning T-Vector去除了PCR產(chǎn)物插入?yún)^(qū)域兩側(cè)所有的酶切位點(diǎn)。PCR產(chǎn)物克隆后如果使用其兩端的酶切位點(diǎn)進(jìn)行酶切時(shí),T載體上不會(huì)有相同的酶切位點(diǎn)影響酶切反應(yīng),可以大大提高酶切效率,增加亞克隆成功率。多克隆位點(diǎn)的消除并不影響β-半乳糖苷酶的正常表達(dá),PCR產(chǎn)物克隆后仍可以利用α-互補(bǔ)性進(jìn)行藍(lán)白斑篩選,挑選陽性克隆。由于本pSC-T載體上消除了多克隆酶切位點(diǎn),克隆后的PCR產(chǎn)物將無法使用載體上的限制酶切下,需要在PCR擴(kuò)增引物上導(dǎo)入合適的酶切位點(diǎn)。
· 產(chǎn)品組成
pSC-T vector(25 ng/μl) 40μl
T4 DNA Ligase 30μl
2×Quick Ligation Buffer 500μl
10×Ligation Buffer 500μl
Control Insert(50 ng/μl) 10μl
2×Fast Taq Master Mix (Quick Load型) 2×1ml
DL2,000 Plus DNA Marker 100μl
· 質(zhì)量保證
Control Insert克隆后的白色菌落中,有90%以上含有Insert DNA片段。
Control Insert經(jīng)克隆后,經(jīng)測序確認(rèn)“T” 突出的存在。
· 15分鐘快速連接
隨酶提供*配方的2×快速及10×普通T4 DNA Ligation Buffer;
使用2X 快速buffer在室溫(25°C)下,僅需15分鐘即可完成連接反應(yīng);
自帶超快PCR鑒定2×Fast Taq Master Mix及DNA Marker
2×Fast Taq Master Mix (Quick Load型)已含有PCR反應(yīng)所需的快速型PCR聚合酶、dNTP混合物、MgCl2、上樣染料以及反應(yīng)緩沖液預(yù)先,使用時(shí)只需再加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進(jìn)行PCR反應(yīng)。其擴(kuò)增速度為普通Taq酶的數(shù)倍,因此可大幅度縮短PCR鑒定過程所需要的時(shí)間, 試劑盒自帶預(yù)混1×Loading Buffer的DL2,000 Plus DNA Marker,能滿足絕大部分PCR產(chǎn)物電泳的需要。
目錄號 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 說明書下載 |
T001-01A | 20次 | 500元 | 說明書 載體序列 |
T001-01B | A包裝×5 | 2250元 |