農(nóng)藥殘留法
1 農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中農(nóng)藥的應(yīng)用地位
農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展關(guān)系到國家經(jīng)濟建設(shè)和社會穩(wěn)定的全局。農(nóng)作物病、蟲、草害等是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要生物災(zāi)害。據(jù)資料記載中國有害生物為2,300多種,這些有害生物不僅種類多、分布廣泛,而且成災(zāi)條件復(fù)雜,發(fā)生頻繁。如不進行防治,每年將損失糧食總產(chǎn)量15%、棉花20%-25%、蔬菜25%以上。我國農(nóng)藥每年實際產(chǎn)量約40萬噸,僅次于美國據(jù)*二位,年用量約27萬噸,居世界前列。據(jù)統(tǒng)計,九十年代我國農(nóng)業(yè)平均每年發(fā)生病蟲草鼠44億畝次,防治面積為49億畝次,僅以防治有害生物計算,每年挽回的糧食損失即達6,500多萬噸,相當(dāng)于3.25億人的口糧(按每人每年200千克計算)。
在生物災(zāi)害的綜合治理中,根據(jù)目前植物保護學(xué)科發(fā)展的水平,化學(xué)防治仍然是zui方便、zui穩(wěn)定、zui有效、zui可靠、zui廉價的防治手段。尤其是當(dāng)遇到突發(fā)性、侵入型生物災(zāi)害發(fā)生時,尚無任何防治方法能夠代替化學(xué)農(nóng)藥,唯有化學(xué)防治方能奏效。在可預(yù)見的未來,農(nóng)業(yè)生產(chǎn)離不開農(nóng)藥。
2 農(nóng)藥殘留檢測的必要性
隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展,農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)越來越依賴于農(nóng)藥、抗生素和激素等外源物質(zhì)。我國農(nóng)藥在糧食、蔬菜、水果、茶葉上的用量居高不下,而這些物質(zhì)的不合理使用必將導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留超標,影響消費者食用安全,嚴重時會造成消費者致病、發(fā)育不正常,甚至直接導(dǎo)致中毒死亡。農(nóng)藥殘留超標也會影響農(nóng)產(chǎn)品的貿(mào)易。
3 農(nóng)藥殘留主要的檢測方法
上用于農(nóng)藥殘留快速檢測方法種類繁多,究其原理來說主要分為兩大類:生化測定法和色譜快速檢測法。
生化檢測法是利用生物體內(nèi)提取出的某種生化物質(zhì)進行的生化反應(yīng)來判斷農(nóng)藥殘留是否存在以及農(nóng)藥污染情況,在測定時樣本無需經(jīng)過凈化,或凈化比較簡單,檢測速度快。生化檢測法中又以酶抑制法和酶聯(lián)免疫法應(yīng)用。
色譜快速檢測法通過盡可能的簡化樣品凈化步驟,直接提取進樣分析蔬菜和水果中的有機磷類農(nóng)藥殘留。上述快速檢測方法在具體應(yīng)用中可以根據(jù)實際情況和方法各自適用范圍及優(yōu)缺點來選擇使用。
(一)、農(nóng)藥殘毒速測法
農(nóng)藥殘毒速測法只限于檢測蔬菜和水果中的有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒,是依據(jù)有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制生物體內(nèi)乙酰膽堿酯酶的活性來檢測上述兩類農(nóng)藥殘毒的原理。
近年來,每年因食用殘留量嚴重超標農(nóng)產(chǎn)品引起急性中毒事故時常發(fā)生,特別是食用了高毒有機磷類農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥嚴重超標的蔬菜和水果極易引起急性中毒,甚至導(dǎo)致食用者死亡。由于蔬菜、水果類鮮食農(nóng)產(chǎn)品保存時間相對短的特點,因此市場急需有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥(這兩種農(nóng)藥中高毒農(nóng)藥比例大,比如甲胺磷、對硫磷、氧化樂果、甲拌磷、克百威、涕滅威等)殘毒快速檢測方法。
農(nóng)藥殘毒速測法可以快速檢測上述兩類農(nóng)藥嚴重超標的蔬菜、水果,通過將一部分含農(nóng)藥殘毒的蔬菜不允許上市場,達到防止食用引起急性中毒問題出現(xiàn)。同時該方法還具有短時間能夠檢測大量樣本、檢測成本低,對于檢測人員技術(shù)水平要求低,易于在基層(如:蔬菜、水果生產(chǎn)基地和批發(fā)市場等)推廣等特點,是目前階段我國控制高毒農(nóng)藥殘留的一種有效方法,也是目前國內(nèi)應(yīng)用的農(nóng)藥殘毒快速檢測方法。但是農(nóng)藥殘毒速測法也有其本身局限性,如:檢測農(nóng)藥種類只限于有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥,不能給出定性、定量檢測結(jié)果,檢測限普遍高和國內(nèi)規(guī)定的殘留*值,因此不能作為法律仲裁依據(jù)。*農(nóng)藥檢定所依據(jù)酶抑制法原理制定了甲胺磷、氧化樂果等8種有機磷農(nóng)藥,克百威、涕滅威等10種氨基甲酸酯類農(nóng)藥的蔬菜農(nóng)藥殘毒快速檢測法農(nóng)業(yè)行業(yè)標準。盡管農(nóng)藥殘毒快速檢測法還存在一定缺陷,但是在東南亞一些國家如韓國、泰國、越南以及我國的中國臺灣、香港地區(qū)仍然得到了廣泛使用,特別是在中國臺灣應(yīng)用是從1985開始,經(jīng)過20多年的持續(xù)發(fā)展,已經(jīng)形成了一整套完整的管理制度,快速檢測方法涵蓋苯硫磷等27種有機磷、丁硫克百威等13種氨基甲酸酯類農(nóng)藥。
(二)、酶聯(lián)免疫法和色譜快速檢測法
酶聯(lián)免疫法是以抗原與抗體的特異性、可逆性結(jié)合反映為基礎(chǔ)的農(nóng)藥殘留檢測方法,主要檢測方式是采用試劑盒。酶聯(lián)免疫法具有專一性強、靈敏度高、快速、操作簡單等優(yōu)點。由于受到農(nóng)藥種類繁多,抗體制備難度大(大約50種左右)、在不能肯定樣本中存在農(nóng)藥殘留種類時檢測有一定的盲目性以及抗體依賴國外進口等影響,酶聯(lián)免疫法的應(yīng)用范圍受到較大的限制。
色譜檢測法主要步驟為:樣本提取后經(jīng)過嚴格凈化步驟,在用色譜或色譜與質(zhì)譜聯(lián)用等技術(shù)進行定性、定量測定。常規(guī)儀器檢測法為了保持較高的回收率和靈敏度,必須相應(yīng)加強前處理,使得樣本提取和凈化步驟越來越費時。氣相色譜快速檢測法則通過盡可能的簡化凈化步驟,提取后直接分析蔬菜和水果中的有機磷類農(nóng)藥,大大提高檢測速度。該方法zui大優(yōu)點是能給出蔬菜和水果中有機磷類農(nóng)藥的定性、定量結(jié)果,提供仲裁依據(jù)。方法涵蓋74種有機磷類農(nóng)藥在水果或蔬菜中殘留檢測,幾乎可以包括所有在我國登記注冊的有機磷類農(nóng)藥品種。但對于檢測人員的技術(shù)要求較高,需要較大的檢測設(shè)備投入。
(三)、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥速測技術(shù)
擬除蟲菊酯(Pyrethroids)是一類合成殺蟲劑,主要應(yīng)用在農(nóng)業(yè)上,還被廣泛應(yīng)用于家用殺蟲劑。由于2007年1月1日高毒有機磷農(nóng)藥在我國全面禁用,菊酯類農(nóng)藥作為高毒有機磷殺蟲劑的理想替代品便成為農(nóng)藥發(fā)展的主流趨勢。雖然菊酯類農(nóng)藥相對有機磷農(nóng)藥來講屬于低毒農(nóng)藥,但其為神經(jīng)毒物。研究證明菊酯類農(nóng)藥具有擬雌激素活性.生殖內(nèi)分泌毒性,對免疫、心血管系統(tǒng)等多方面均能造成危害。這類化學(xué)農(nóng)藥的大量使用造成了環(huán)境的嚴重污染、生態(tài)平衡的嚴重破壞,從而危害了人類的健康。尤其是茶葉、谷物、水果、蔬菜等食品中殘留的低濃度農(nóng)藥進入人體所造成的慢性和亞慢性毒性問題,更不可忽視。曾有報道氯菊酯對一些動物如蜜蜂及對人類有益的昆蟲毒性較高,對水生生物如魚、龍蝦等具有明顯的毒性且在有機體中易于富集,并能造成小鼠的肝腎腫瘤。人長期飲用擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量超標的茶水易中毒,甚至存在致癌的隱患
我國入世以來,農(nóng)副產(chǎn)品特別是茶葉、水果與蔬菜中的農(nóng)藥殘留問題成為出口貿(mào)易的主要障礙。其中茶葉中氰戊菊酯的殘留問題尤為嚴重,據(jù)我國在1993-1998年對全國14個省市的1300多只茶樣的分析結(jié)果,如按我國頒布的2mg·kg-1標準,氰戊菊酯只有0.50%~4.50%超標,如按國外的1mg·kg-1(歐盟2000年以前的農(nóng)殘標準)標準,超標率可達50%以上。據(jù)歐盟1994~1998年的分析結(jié)果,茶葉中氰戊菊酯的陽性率為45%~100%,1998年綠茶陽性率為73.0%,紅茶為50.8%,平均殘留水平為0.41~1.32mg·kg-1,這樣如按0.1mg·kg-1(歐盟2000年后的農(nóng)殘標準)標準實施,則綠茶超標率將達37.9%,紅茶超標率達42.7%。據(jù)1999年1~6月的分析結(jié)果,氰戊菊酯如按0.1mg·kg-1標準計算,檢出率高達90%以上,超標率在70%以上。
在蔬菜中,擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的殘留主要集中在葉菜與瓜茄類蔬菜中。從各國與組織在水果、蔬菜與動物性食品中的農(nóng)殘標準來看,擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的zui低殘留*值逐漸降低。
目前,國內(nèi)外相關(guān)研究主要集中在針對單一農(nóng)藥的特異性免疫檢測方法的建立上,而實際上農(nóng)產(chǎn)品中的殘留農(nóng)藥往往有多種共存現(xiàn)象,單一農(nóng)藥組份的免疫分析技術(shù)通常難以滿足實際檢測的需要。因此,發(fā)展農(nóng)藥多殘留免疫檢測技術(shù)是當(dāng)前國內(nèi)外農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究領(lǐng)域的前沿和發(fā)展趨勢之一。目前,我公司正與上海交通大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)等國內(nèi)高校聯(lián)合開展相關(guān)研究。
4 關(guān)于蔥、蒜、蘿卜、韭菜等樣品農(nóng)殘檢測中處理的說明
蔥、蒜、蘿卜、韭菜等因為含有色素、纖維素、次生物質(zhì)等較多的蔬菜樣品在農(nóng)藥殘留檢測過程中會導(dǎo)致假陽性比較高,一般建議的處理方式如下,特此說明。
- 按照《GB/T 5009.199─2003(國標)蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量快速檢測》中的方法:
蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時,可采取整株(體)蔬菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜,也可采取整株(體)蔬菜浸提的方法,減少色素的干擾;
- 含色素明顯的蔬菜樣品(如:蘿卜、蕃茄)等在樣品處理中,加1-2g活性碳振蕩過濾2分鐘,提取濾液中的上清液開展檢測;
- 含纖維素明顯的蔬菜樣品(如:蘑菇)等在樣品處理過程中,用密性濾紙過濾,提取濾液中的上清液開展檢測;
針對蔥、蒜等刺激性植物易抑制酶活性反應(yīng)的現(xiàn)象還可適當(dāng)提高對應(yīng)樣品檢出限的方法特殊處理;