Qiagen 217184 人體血漿和血清miRNA提取試劑盒miRNeasy Serum/Plasma Kit (50)

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產(chǎn)品信息

Qiagen現(xiàn)貨miRNeasy Serum/Plasma Kit (50) Qiagen現(xiàn)貨miRNeasy Serum/Plasma Kit (50)

產(chǎn)品描述

用于從動(dòng)物及人體血漿和血清中純化包括miRNA的無(wú)細(xì)胞總RNA內(nèi)參用于標(biāo)準(zhǔn)化，洗脫體積小化，高純度RNA，適合多種下游應(yīng)用，簡(jiǎn)單、靈敏的操作流程，自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)方案。

miRNeasy Serum/Plasma Kit可從至多200 µl血清或血漿中有效純化RNA。miRNeasy Kits制備的RNA純度高，可直接用于敏感的下游應(yīng)用。miRNeasy操作流程將鹽或苯酚污染的可能性降到較低，這些污染可能影響后續(xù)分析。

miRNeasy Serum/Plasma Kit整合了基于苯酚/胍的樣本裂解方法和基于硅膠膜的總RNA純化方法。試劑盒中包括的QIAzol Lysis Reagent是苯酚和異硫氰酸胍的單相溶液，便于裂解組織，抑制RNases，并去除大部分有機(jī)抽提裂解液中的胞內(nèi)DNA和蛋白。

Procedure

血清和血漿樣本溶于QIAzol Lysis Reagent中。加入氯f(wàn)ang后，裂解液離心后分成水相和有機(jī)相。RNA位于上層水相，DNA位于中間相，蛋白位于下層有機(jī)相或中間相。

提取上層水相后，加入乙醇以提供RNA結(jié)合的合適條件，RNA分子大于18個(gè)核苷酸。樣品再加入RNeasy MinElute離心柱，總RNA結(jié)合到膜上，苯酚和其他污染物被有效洗去。高品質(zhì)RNA在小體積不含RNase水中洗脫。

血清和血漿中主要含有小RNAs，因此無(wú)需分開純化小RNA和大RNA組分。

使用miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化

使用miRNeasy Serum/Plasma Kit純化miRNA時(shí)，加入QIAzol Lysis Reagent后，在加入氯f(wàn)ang分相前，向樣本中加入miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control。real-time RT-PCR后，合成miRNA的CT值可對(duì)樣本進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，可作為不同RNA純化產(chǎn)量和擴(kuò)增效率的對(duì)照。此外，通過(guò)與合成miRNA的標(biāo)準(zhǔn)曲線CT值比較，可評(píng)估RNA的回收，因?yàn)楹铣蒻iRNA與RNA純化流程無(wú)關(guān)。

在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上進(jìn)行miRNA自動(dòng)純化 

在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上可*自動(dòng)純化包括miRNA的總RNA。新型QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀采用*技術(shù)處理QIAGEN離心柱，將自動(dòng)化、低通量樣品制備無(wú)縫整合到實(shí)驗(yàn)室工作流程中。使用QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀的樣品制備流程與手工操作相同（如裂解、結(jié)合、洗滌和洗脫），可使用miRNeasy Serum/Plasma Kit進(jìn)一步純化高品質(zhì)RNA。

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2017年開發(fā)自主產(chǎn)品線具體產(chǎn)品線包括免 疫 學(xué)：一抗、二抗、成套免疫組化試劑盒相關(guān)試劑；細(xì)胞生物學(xué)：細(xì)胞因子、細(xì)胞凋亡/轉(zhuǎn)染、血清、培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)試劑；分子生物學(xué)：內(nèi)切酶、Marker、核酸提取、PCR及RT-PCR、DIG標(biāo)記檢測(cè)等相關(guān)試劑；檢測(cè)試劑盒： ELISA檢測(cè)試劑盒、放免疫檢測(cè)試劑盒；常用試劑： 氨基酸、蛋白質(zhì)、碳水化合物、抗生素、維生素、染料等。 
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