GelRed核酸染料(10,000水溶液)

­——EB核酸染料的無(wú)毒性替代品

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品描述

GelRed是一種*的油性大分子，不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。不易揮發(fā)升華，人體不會(huì)吸入。艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果也表明GelRed在凝膠染色濃度下*無(wú)誘變性，相對(duì)于EB的強(qiáng)致癌性是一種安全無(wú)毒的核酸染料。GelRed與EB具有相同的光譜特性，無(wú)需改變?yōu)V光片及觀察裝置（普通紫外凝膠透射儀），在300nm處紫外光激發(fā)檢測(cè)即可。GelRed適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的dsDNA,ssDNA以及RNA染色，可以選擇膠染法或泡染法進(jìn)行染色，使用非常方便和靈活。

使用方法

一、膠染法（同EB，電泳前染色）

1) 制膠時(shí)加入GelRed 核酸染料（每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL GelRed 10,000×水溶液）。

2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

注意事項(xiàng)

1)  此方法比較節(jié)省染料，500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。

2) 由于GelRed具有良好的熱穩(wěn)定性，可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將GelRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中，然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。

3) GelRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。

4) 含有染料的預(yù)制凝膠溶液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。

5) 如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認(rèn)問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在，則說(shuō)明問題與染料無(wú)關(guān)，請(qǐng)嘗試：降低瓊脂糖濃度；選用更長(zhǎng)的凝膠；延長(zhǎng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰；改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。

6)  膠染法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠，對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。

二、泡染法（電泳后染色）

1.  按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

2.  用H₂O將GelRed 10,000×水溶液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中，制成3× 染色液。（如將15μL GelRed 10,000×水溶液和5mL 1M NaCl加到45mL H₂O中）。

3.  將凝膠小心地放入合適的容器中，緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右，*染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5～10％聚丙烯酰胺的凝膠，染色時(shí)間通常介于30min到1h，并隨聚丙烯酰胺含量增加而延長(zhǎng)。

注意事項(xiàng)

1)  用泡染法染色時(shí)，染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。

2)  3× GelRed染色液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。