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更新時(shí)間:2025-02-14 11:56:46瀏覽次數(shù):1398次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)Masson 染色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)
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信帆生物:蘇木精-伊紅染色(HE)染色服務(wù)
服務(wù)介紹:HE染色(蘇木精-伊紅染色)是組織學(xué)中常用的染色方法之一,用于顯示組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)。蘇木精(Hematoxylin)將細(xì)胞核染成藍(lán)色,而伊紅(Eosin)將細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)染成粉紅色。HE染色廣泛應(yīng)用于病理學(xué)診斷、生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)教育。
檢測(cè)原理:
HE染色利用兩種主要染料——蘇木精和伊紅,對(duì)組織切片進(jìn)行染色。蘇木精是一種堿性染料,能夠?qū)⒓?xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)和胞質(zhì)內(nèi)的核酸染成藍(lán)紫色。其染色原理是蘇木精的陽離子與組織細(xì)胞中帶負(fù)電荷的成分(如核酸等)結(jié)合,形成藍(lán)色的復(fù)合物。而伊紅是一種酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分染成紅色或粉紅色。其染色原理是伊紅的陰離子與組織細(xì)胞中帶正電荷的成分(如蛋白質(zhì)等)結(jié)合,形成紅色的復(fù)合物。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、組織固定:選取新鮮的組織樣本,大小適中,常用固定劑如甲醛、乙醇或福爾馬林等固定組織細(xì)胞,使其形態(tài)和結(jié)構(gòu)保持穩(wěn)定。
2、脫水:將固定的組織通過一系列濃度遞增的乙醇溶液進(jìn)行脫水處理,去除組織中的水分。
3、浸蠟與包埋:脫水后的組織浸入石蠟中,使石蠟滲透到組織內(nèi)部,然后進(jìn)行包埋,制成蠟塊。
4、切片:使用切片機(jī)將蠟塊切成薄片,通常厚度為4~6微米。
5、脫蠟:將切片放入二甲苯等透明劑中,去除切片上的石蠟。
6、染色:先使用蘇木精對(duì)切片進(jìn)行染色,使細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)紫色;然后使用伊紅對(duì)切片進(jìn)行染色,使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)呈現(xiàn)紅色或粉紅色。
7、脫水與透明:染色后的切片通過一系列濃度遞增的乙醇溶液進(jìn)行脫水處理,然后使用透明劑(如二甲苯)使切片透明。
8、封片:將切片置于載玻片上,使用封片劑(如中性樹膠)封固切片邊緣,制成長(zhǎng)期保存的玻片。
注意事項(xiàng):
1、組織固定:固定時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,通常為24-48小時(shí)。
2、切片厚度:切片厚度應(yīng)均勻,通常為4-6 µm。
3、染色時(shí)間:根據(jù)染液濃度和組織類型調(diào)整染色時(shí)間。
4、分化與返藍(lán):分化時(shí)間不宜過長(zhǎng),返藍(lán)要充分。
5、封片:避免封片時(shí)產(chǎn)生氣泡。
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