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性激素放免試劑盒太好用啦

時間:2017-9-26閱讀:1659
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性激素放免試劑盒基本信息簡介

性激素sexhormone(化學本質(zhì)是脂質(zhì))是指由動物體的性腺,以及胎盤、腎上腺皮質(zhì)網(wǎng)狀帶等組織合成的甾體激素,具有促進性器官成熟、副性征發(fā)育及維持性功能等作用。雌性動物卵巢主要分泌兩種性激素——雌激素與孕激素,雄性動物睪丸主要分泌以睪酮為主的雄激素。中文名 性激素;外文名 sexhormone;本質(zhì) 脂質(zhì);來源 動物分泌,人工合成;分類 雌性激素,雄性激素,孕激素。

激素的生理作用雖然非常復雜,但是可以歸納為五個方面:

*,通過調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)、糖和脂肪等三大營養(yǎng)物質(zhì)和水、鹽等代謝,為生命活動供給能量,維持代謝的動態(tài)平衡。

第二,促進細胞的增殖與分化,影響細胞的衰老,確保各組織、各器官的正常生長、發(fā)育,以及細胞的更新與衰老。例如生長激素、甲狀腺激素、性激素等都是促進生長發(fā)育的激素。

第三,促進生殖器官的發(fā)育成熟、生殖功能,以及性激素的分泌和調(diào)節(jié),包括生卵、排卵、生精、受精、著床、妊娠及泌乳等一系列生殖過程。

第四,影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)和植物性神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育及其活動,與學習、記憶及行為的關(guān)系。

第五,與神經(jīng)系統(tǒng)密切配合調(diào)節(jié)機體對環(huán)境的適應(yīng)。

上述五方面的作用很難截然分開,而且不論哪一種作用,激素只是起著信使作用,傳遞某些生理過程的信息,對生理過程起著加速或減慢的作用,不能引起任何新的生理活動。

性激素只對一定的組織或細胞(稱為靶組織或靶細胞)發(fā)揮*的作用。人體的每一種組織、細胞,都可成為這種或那種激素的靶組織或靶細胞。而每一種激素,又可以選擇一種或幾種組織、細胞作為本激素的靶組織或靶細胞。如生長激素可以在骨骼、肌肉、結(jié)締組織和內(nèi)臟上發(fā)揮*作用,使人體長得高大粗壯。但肌肉也充當了雄激素、甲狀腺素的靶組織。

性激素在分子水平上的作用方式,與其他甾體激素一樣,進入細胞后與特定的受體蛋白結(jié)合,形成激素-受體復合物,然后結(jié)合于細胞核,作用于染色質(zhì),影響DNA的轉(zhuǎn)錄活動,導致新的、或增加已有的蛋白質(zhì)的生物合成,從而調(diào)控細胞的代謝、生長或分化。性激素為小分子物質(zhì),具有脂溶性,主要通過自由擴散(被動運輸)進入細胞內(nèi),與胞漿受體結(jié)合,形成激素-胞漿受體復合物,通過構(gòu)象變化和熱休克蛋白解離獲得進入細胞核內(nèi)的能力,并由胞漿轉(zhuǎn)移至核內(nèi),激素與核內(nèi)受體結(jié)合,形成激素-核受體復合物,從而激發(fā)DNA的轉(zhuǎn)錄過程,生成特異mRNA,然后進入胞漿,在核糖體內(nèi)翻譯形成蛋白質(zhì),發(fā)揮生物效應(yīng)。

性激素的高度專一性包括組織專一性和效應(yīng)專一性。前者指激素作用于特定的靶細胞、靶組織、靶器官。后者指激素有選擇地調(diào)節(jié)某一代謝過程的特定環(huán)節(jié)。例如,胰高血糖素、腎上腺素、糖皮質(zhì)激素都有升高血糖的作用,但胰高血糖素主要作用于肝細胞,通過促進肝糖原分解和加強糖異生作用,直接向血液輸送葡萄糖;腎上腺素主要作用于骨骼肌細胞,促進肌糖原分解,間接補充血糖;糖皮質(zhì)激素則主要通過刺激骨骼肌細胞,使蛋白質(zhì)和氨基酸分解,以及促進肝細胞糖異生作用來補充血糖。激素的作用是從激素與受體結(jié)合開始的。靶細胞介導激素調(diào)節(jié)效應(yīng)的專一性激素結(jié)合蛋白,稱為激素受體。受體一般是糖蛋白,有些分布在靶細胞質(zhì)膜表面,稱為細胞表面受體;有些分布在細胞內(nèi)部,稱為細胞內(nèi)受體,如甲狀腺素受體。

性激素放免試劑盒操作方法 

實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。

為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。

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