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13775ES60Lyo-nCoV Multiplex One Step RT-qPCR Kit (with MgCl
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 13775ES60 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：293更新時間：2023-03-15 08:57:54
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 13775ES60 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） | *（元） |
Hieff Unicon® V Lyo-nCoV Multiplex One Step RT-qPCR Kit (with MgCl2) | 13775ES60 | 100 T | 3565.00 | 1100.00 |
13775ES80 | 1000 T | 28515.00 | 9800.00 | |
13775ES92 | 10000 T | 228115.00 | 78400.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff Unicon® V Lyo-nCoV Multiplex One Step RT-qPCR Kit (with MgCl2) 是以RNA為模板進行多重定量PCR反應的試劑盒。在實驗的過程中，逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在同一反應管中進行，簡化了實驗操作，降低了污染的風險。*的Buffer和酶的設計，可用于一步法RT-qPCR凍干反應體系的配制和產(chǎn)品設計。
本試劑盒利用耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一鏈cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase進行定量擴增。本試劑盒主要包含優(yōu)化的凍干Buffer，Enzymes Mix等，并添加了有效抑制非特異性PCR擴增的因子和提升多重qPCR反應擴增效率的因子，能夠在保證引物擴增效率的同時，進行多重熒光定量擴增反應。
本試劑盒酶mix中匹配凍干保護劑，可以直接用于凍干。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | ||
13775ES60 (100 T) | 13775ES80 (1000 T) | 13775ES92 (10000 T) | ||
13775-A | 4×Hifair® V Lyo-Buffer | 600 μL | 6 mL | 60 mL |
13775-B | MgCl2 (25 mM) | 500 μL | 5 mL | 50 mL |
13775-C | 10×Hifair® V Lyo-Enzyme Mix | 240 μL | 2.4 mL | 24 mL |
【注】：1) 4×Hifair® V Lyo-Buffer為Lyo-nCoV Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的簡寫。
2) 10×Hifair® V Lyo-Enzyme Mix主要包含有耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
適用機型
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex，Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™，Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™，Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000，Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96，Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
運輸與保存方法
冰袋運輸。-20°C保存，有效期9個月。本品避免反復凍融。建議分裝保存。
注意事項
實驗過程中請使用RNase free耗材。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
反應體系（以25 μL為例）
組分 | 體積（μL） | 終濃度 |
4×Hifair® V Lyo-Buffer | 6 | 1× |
10×Hifair® V Lyo-Enzyme Mix | 2.4 | - |
MgCl2 (25 mM) | 3 | |
Primer Mix (10 μM) | 各0.4 | 0.16 μM |
Probe Mix (10 μM) | 各0.2 | 0.08 μM |
模板 RNA | 1-5 | - |
RNase Free H2O | to 25 | - |
【注】：使用前務必充分混勻，避免劇烈震蕩產(chǎn)生過多氣泡。
a) 引物濃度：Primer Mix中包含多對引物，通常每條引物終濃度可以根據(jù)情況在0.1-1.0 μM間進行調(diào)整。
b) 探針濃度：Probe Mix中包含多條不同熒光信號的探針，每條探針的濃度可根據(jù)具體情況在50-300 nM間調(diào)整。
c) 模板稀釋：qPCR靈敏度*，建議將模板進行稀釋使用，控制Ct值在20-35之間適宜。
d) 反應體系：推薦使用25 μL或50 μL，以保證目的基因擴增的有效性和重復性。
e) 體系配制：請于超凈工作臺內(nèi)配制，并使用無核酸酶殘留的槍頭、反應管；推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。
標準擴增程序
反應階段 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) | |
1 | 逆轉(zhuǎn)錄 | 50°Ca | 10 min | 1 |
2 | 預變性 | 95°C | 5 min | 1 |
3 | 擴增反應 | 95°C | 15 sec | 45 |
60°Cb | 30 secc |
【注】：
a) 逆轉(zhuǎn)錄：42°C或者50°C均可，時間 10-15 min。
b) 擴增反應：擴增反應溫度根據(jù)設計的引物Tm值進行調(diào)整。CDC*推薦的ORF1ab和N引物，退火溫度建議≥60°C。
c) 熒光信號采集：不同的qPCR檢測儀器所需的熒光信號采集時間不同，請根據(jù)最短時間限制進行設置。
本試劑可以直接用于凍干，也可以進一步在此基礎上針對不同引物，進一步摸索輔料，本試劑的標準凍干程序如下：
溫度 | 斜率時間 | 時間 | 真空 mbar | 備注 | ||
預凍 | 1 | -45°C | —— | 4 h | —— | 常溫最快速率降溫 |
2 | -45°C | —— | —— | 保持，根據(jù)包材驗證保持時間 | ||
真空 | 3 | -45°C | —— | 0.01 | ||
升華階段 | 4 | -40°C | 1 h | 10 h | 0.01 | 無斜率控制型凍干機，可分6個階段升溫 |
5 | 0°C | 1 h | 10 h | 0.01 | ||
6 | 0.01 | 無斜率控制型凍干機，可分6個階段升溫 | ||||
解析干燥 | 7 | 25°C | 1 h | 4 h | 0 | |
含水量控制 | 8 | 壓升測試重試時間：30 min | 壓升測試：2 min<5 Pa | |||
制品保存溫度 | 9 | 0°C | 1 | X | 0 | |
注意事項：
1. 輔料配方發(fā)生微量的變化，需重新測定凍干參數(shù)，并做相應調(diào)整。
2. 凍干設備要求：
冷阱盤管表面溫度≤ -60°C
板層溫度≤-45°C，溫度均一性±1°C
可做壓升測試（凍干生產(chǎn)前，做泄漏率測試）
3. 環(huán)境要求：
溶液分裝及配置盡量在萬級層流保護下進行，環(huán)境空間塵埃掉落進溶液中成為凍干過程的晶核，影響溶液的結晶的過冷度，導致產(chǎn)品質(zhì)量不一致性。
4. 真空控制
摻氣方式：建議摻入氣體為高純氮氣
5. 凍干試劑MIX工藝參數(shù)設定參考（凍干設備升華效率≥1 mm/小時）。
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HB220113
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