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干貨分享 | 深入探索全能核酸酶在生物制藥及基礎(chǔ)科研中的應(yīng)用

2024-9-2  閱讀(123)

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全能核酸酶(UltraNuclease)是一種高效的非特異性核酸內(nèi)切酶,能夠廣泛降解DNA和RNA,包括單鏈、雙鏈、線性、環(huán)狀和超螺旋結(jié)構(gòu)。其由特定氨基酸序列構(gòu)成的三維蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),賦予了其識(shí)別和切割各種核酸的能力。

 

基于全能核酸酶強(qiáng)大的特性,在生物制藥領(lǐng)域以及科學(xué)研究中,無論是在細(xì)胞的處理,還是蛋白的相關(guān)研究中,它都發(fā)揮著至關(guān)重要且巨大作用。

 


 

 

01

生物制藥領(lǐng)域中的應(yīng)用

 

在生物制藥領(lǐng)域,全能核酸酶的應(yīng)用價(jià)值尤為顯著。在生產(chǎn)重組蛋白、疫苗以及抗體藥物等過程中,宿主細(xì)胞核酸的殘留往往是影響產(chǎn)品純度和質(zhì)量的關(guān)鍵因素。全能核酸酶能夠高效且特異性地降解這些殘留核酸,顯著提高生物制品的純度,降低潛在的免疫原性風(fēng)險(xiǎn)。此外,通過對核酸的降解,它能有效地降低溶液的粘度,改善產(chǎn)品的過濾和分離特性,從而優(yōu)化整個(gè)生產(chǎn)工藝流程,提高生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。

1. 宿主細(xì)胞殘留核酸的清除

在生物制藥中,宿主細(xì)胞DNA和RNA的殘留是影響產(chǎn)品質(zhì)量和安全性的關(guān)鍵因素。全能核酸酶能夠高效地降解這些殘留核酸:

  • 降低免疫原性:宿主細(xì)胞DNA可能觸發(fā)免疫反應(yīng),全能核酸酶通過降解DNA,降低了這種風(fēng)險(xiǎn);

  • 提高純度:核酸的降解有助于提高最終產(chǎn)品的純度,減少可能的污染源。

2. 生物制品的穩(wěn)定性和活性

全能核酸酶通過降解可能與病毒載體或蛋白結(jié)合的核酸,減少非特異性吸附,從而提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性和生物活性:

  • 防止蛋白質(zhì)聚集:核酸的降解減少了蛋白質(zhì)之間的非特異性相互作用,有助于維持蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性和活性;

  • 避免非特異性結(jié)合:核酸的降解減少了蛋白質(zhì)與核酸的非特異性結(jié)合,從而減少了可能影響藥物活性的復(fù)合物的形成。

3. 生物制品的純化和分離

全能核酸酶在病毒載體及蛋白的純化過程中,有助于去除雜質(zhì),提高病毒載體及蛋白的純度,確保質(zhì)量:

  • 改善層析效率:核酸的降解改善了層析介質(zhì)的流動(dòng)力學(xué)特性,使得蛋白質(zhì)能夠更高效地被分離。

  • 減少樣品損失:通過減少核酸引起的非特異性吸附,全能核酸酶有助于減少在純化過程中的樣品損失。

4. 生物制品的質(zhì)量控制

全能核酸酶在生物制品的質(zhì)量控制過程中,通過降解核酸雜質(zhì),有助于提高生物制品的質(zhì)量,滿足藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)的要求:

  • 核酸殘留檢測:通過測定全能核酸酶的活性,可以間接評估生物制品中核酸殘留的水平;

  • 驗(yàn)證工藝的穩(wěn)定性:全能核酸酶的使用效果可以作為驗(yàn)證生物制藥工藝穩(wěn)定性的一個(gè)指標(biāo)。

5. 工藝優(yōu)化和放大

全能核酸酶在生物制品的規(guī)?;a(chǎn)中,有助于提高生產(chǎn)效率,降低生產(chǎn)成本,滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需求:

  • 反應(yīng)條件的優(yōu)化:需要根據(jù)具體的生物制品和工藝流程,優(yōu)化全能核酸酶的使用條件,包括酶的濃度、作用時(shí)間和溫度等。

  • 規(guī)?;a(chǎn):在規(guī)?;a(chǎn)中,全能核酸酶的使用需要考慮到成本效益和操作的可行性。

 

 

02

基礎(chǔ)科研-細(xì)胞培養(yǎng)及蛋白制備中的應(yīng)用

 

在細(xì)胞培養(yǎng)方面,全能核酸酶也發(fā)揮著重要作用。當(dāng)細(xì)胞裂解以獲取其中的目標(biāo)成分時(shí),大量釋放的核酸會(huì)導(dǎo)致溶液粘度增加、蛋白提取困難等問題。全能核酸酶的引入能夠迅速降解這些核酸,避免其對后續(xù)的蛋白提取和純化等實(shí)驗(yàn)步驟造成干擾,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

1. 細(xì)胞培養(yǎng)中的核酸污染控制

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞裂解后釋放的核酸(DNA和RNA)會(huì)迅速形成粘稠的溶液,這不僅增加了溶液的粘度,還可能與蛋白質(zhì)相互作用,形成難以分離的復(fù)合物。全能核酸酶通過以下方式解決這些問題:

  • 核酸降解:全能核酸酶能夠迅速降解細(xì)胞裂解液中的DNA和RNA,減少溶液的粘稠度,從而改善細(xì)胞培養(yǎng)液的流動(dòng)性;

  • 避免非特異性結(jié)合:核酸分子可能與目標(biāo)蛋白非特異性結(jié)合,影響后續(xù)的分離和純化步驟。全能核酸酶通過降解這些核酸,減少了這種非特異性結(jié)合的可能性。

2. 蛋白提取和純化

在蛋白質(zhì)的提取和純化過程中,全能核酸酶的應(yīng)用至關(guān)重要:

  • 提高提取效率:通過降解核酸,全能核酸酶降低了溶液的粘度,使得細(xì)胞裂解液更容易通過過濾或離心等方法進(jìn)行處理,提高了蛋白的提取效率。

  • 減少樣品損失:核酸的降解減少了在過濾或離心過程中可能發(fā)生的樣品吸附和損失,從而提高了蛋白的回收率。

  • 優(yōu)化層析條件:核酸的降解有助于改善層析介質(zhì)的流動(dòng)力學(xué)特性,使得蛋白質(zhì)能夠在更短的時(shí)間內(nèi)以更高的分辨率被分離。

3. 蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和活性

全能核酸酶在保持蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和活性方面也發(fā)揮著作用:

  • 防止蛋白質(zhì)聚集:核酸的降解減少了蛋白質(zhì)之間通過核酸橋接而發(fā)生的聚集,有助于保持蛋白質(zhì)的單體狀態(tài)和活性。

  • 避免酶切:在某些情況下,核酸酶的存在可能會(huì)對蛋白質(zhì)造成意外的酶切,全能核酸酶通過降解核酸,減少了這種風(fēng)險(xiǎn)。

4. 實(shí)驗(yàn)操作的優(yōu)化

在實(shí)驗(yàn)操作層面,全能核酸酶的使用需要精確控制:

  • 反應(yīng)條件的優(yōu)化:全能核酸酶的活性受溫度、pH值和離子強(qiáng)度等因素的影響。因此,需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體條件優(yōu)化這些參數(shù),以確保酶的最佳活性;

  • 酶濃度和作用時(shí)間:適量的酶濃度和適當(dāng)?shù)淖饔脮r(shí)間對于實(shí)現(xiàn)高效的核酸降解至關(guān)重要。過多的酶或過長的作用時(shí)間可能會(huì)對蛋白質(zhì)造成不必要的損傷。

 

 

在生物制藥和生物技術(shù)領(lǐng)域,使用全能核酸酶還需要考慮安全性和合規(guī)性:

  • 殘留物控制:需要確保全能核酸酶及其降解產(chǎn)物在最終產(chǎn)品中的殘留量符合安全標(biāo)準(zhǔn)。

  • 監(jiān)管要求:全能核酸酶的使用和殘留控制需要符合各國藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)的要求,如美國FDA、歐洲EMA等。

 

翌圣生物始終專注于為生物制藥領(lǐng)域提供符合標(biāo)準(zhǔn)的核心原料。為充分滿足客戶的多樣化需求,翌圣生物精心開發(fā)了全能核酸酶以及耐高鹽全能核酸酶等產(chǎn)品,能夠精準(zhǔn)適配客戶不同料液中鹽離子濃度的具體需求。其 GMP 級(jí)別產(chǎn)品的生產(chǎn)過程嚴(yán)格遵循 ISO13485 質(zhì)量體系的規(guī)范進(jìn)行,已經(jīng)成功協(xié)助多家客戶順利完成 IND 申報(bào),積累了極為豐富的項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)。
 
 
 

 

 

 

03

產(chǎn)品信息

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號(hào)

產(chǎn)品規(guī)格

UCF.ME® UltraNuclease 全能核酸酶(同Benzonase)

20156ES25/50/60/

25KU/50KU/100KU

UCF.ME®UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶(同Benzonase)

20157ES25/50/60/80/90

25KU/50KU/100KU/1MU/5MU

Salt Active UltraNuclease GMP-grade 耐高鹽全能核酸酶

20159ES25/50/60/80/90

25KU/50KU/100KU/1MU/5MU

 

04

其他相關(guān)產(chǎn)品

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號(hào)

產(chǎn)品規(guī)格

UCF.ME® UltraNuclease ELISA Kit全能核酸酶檢測試劑盒

36701ES59

96T

Salt Active UltraNuclease ELISA kit耐高鹽全能核酸酶檢測試劑盒

36703ES96

96T



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