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在生命科學(xué)的浩瀚星河中,生物科研工作者們不斷開拓技術(shù),推動著生物領(lǐng)域的邊界向外拓展,克隆技術(shù)如同一座璀璨的燈塔,照亮了基因探索的未知之旅。而已經(jīng)10周歲的小翌,也通過克隆技術(shù)陪伴在大家身邊多年~
用戶反饋一
問:傳統(tǒng)酶切酶連要花好久的時間,光是載體、片段酶切都要花上1-2個小時,還要純化片段,T4 DNA連接酶的連接甚至需要過夜,能不能有一款試劑省去這些步驟呀?
小翌:不用擔(dān)心,小翌這里有一款產(chǎn)品,Hieff Clone®系列克隆試劑盒僅需一步就能幫您連接上載體和片段,單片段的連接時間快至5分鐘,大幅度節(jié)省您的科研時間!
用戶反饋二
問:現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室都是送樣測序,可是平板上的菌落數(shù)長得太少,無法確定一次連接成功,而送一次平板測序價格又很高,重新送測又好麻煩,要怎么辦?
小翌:Hieff Clone®系列克隆試劑盒的載體、片段連接陽性率可達(dá)95%以上,克隆數(shù)多,一次送樣檢測成功率極大提升!
圖1. 兩片段(3 kb)連接。結(jié)果顯示,10923ES菌落數(shù)多,陽性率100%。A:重組轉(zhuǎn)化平板。載體(11.6 kb)和插入片段(3 kb)摩爾比為1:2。B:插入片段PCR鑒定電泳圖,M:Yeasen 10505ES。
用戶反饋三
問:糟糕!我的實(shí)驗(yàn)樣本太珍貴,是老師去野外采集時好不容易取回的,提取的DNA片段只有10 μL(5 ng),連接體系20 μL,至少需要添加60 ng才能連上載體,可是DNA片段還想保留一些,能減少片段投入量或者縮小連接體系嗎?
小翌:可以的,新款克隆試劑盒(Cat#10923ES)連接總體系可低6 μL,載體、片段投入量低,可以充分滿足您的需求,為您節(jié)省珍貴的樣本!
6 μL小體系單片段連接
圖2. 在6 μL小體系非復(fù)蘇感受態(tài)下,連接10 ng低投入量單片段。結(jié)果顯示,10923ES性能好于競品,連接效率高,菌落數(shù)多,陽性率達(dá)100%。A-B:重組轉(zhuǎn)化平板。載體(10 kb)和插入片段(1 kb)摩爾比為1:2。C:插入片段PCR鑒定電泳圖,M:Yeasen 10505ES。
超小體系三片段連接
圖3. 10923ES超小體系連接三片段,連接效率,陽性率達(dá)100%。3 μL總體系連接,10923ES的投入量可低至2 μL。A&C&E:25 ng載體(11.6 kb)+各10 ng片段(1 kb+1.6 kb+1.8 kb)。B&D&F:插入片段PCR鑒定電泳圖。
低濃度多片段高效重組
圖4. 分別連接低濃度的五片段和六片段。結(jié)果顯示,10923ES在低濃度下連接性能穩(wěn)定,菌落數(shù)多,陽性率100%。A-B:重組轉(zhuǎn)化平板。載體(11.6 kb)和插入片段(5片段共5.6 kb、六片段共7.6 kb)摩爾比為1:2。C-D:插入片段PCR鑒定電泳圖,M:Yeasen 10505ES,菌P長度2.6 kb。
用戶反饋四
問:我要構(gòu)建一個新的載體,載體上需要含有6個外源基因片段,可是一次最多連上1-2個片段,每次都得重新設(shè)計同源臂、連接、轉(zhuǎn)化、挑菌、篩選,這一些系列操作至少要一周,就不能一次連上6個片段嗎?
小翌:收到!小翌最新研發(fā)的克隆試劑盒可以一次性連接6個片段到載體上,連接時間縮短至50 min,為您解決煩憂!
圖5. 六片段(7.6 kb)連接。結(jié)果顯示,10923ES產(chǎn)品性能好于競品,菌落數(shù)多,陽性率100%。A-B:重組轉(zhuǎn)化平板。載體(11.6 kb)和插入片段(7.6 kb)摩爾比為1:2。C:插入片段PCR鑒定電泳圖,M:Yeasen 10505ES,菌P長度2.6 kb。
試劑盒穩(wěn)定性好
圖6. 在37℃條件下放置7天,結(jié)果顯示,10923ES在低濃度下依舊穩(wěn)定連接六片段。D-F:重組轉(zhuǎn)化平板。載體(11.6 kb)和插入片段(六片段共7.6 kb)摩爾比為1:2。H:插入片段PCR鑒定電泳圖,M:Yeasen 10505ES,菌P長度2.6 kb。
客戶體驗(yàn)反饋
圖7. 10 μL小體系單片段連接和點(diǎn)突變克隆,10923ES陽性率達(dá)100%。A&C:重組轉(zhuǎn)化平板。B:插入片段PCR鑒定電泳圖,泳道1-5分別為菌落1,菌落2,陰性對照,陽性對照(基因組作為模版),陽性對照(PCR純化片段作為模版)。D:插入片段PCR鑒定電泳圖。
以上就是這么多年來,小翌接收到的真實(shí)反饋,面對用戶的各種問題,翌圣研發(fā)人員努力鉆研,通過內(nèi)部的雙向分子酶理性設(shè)計與定向進(jìn)化平臺,不斷設(shè)計、優(yōu)化克隆試劑盒中的核心重組酶,并添加 的重組增強(qiáng)因子,抑制非同源末端連接,在保證克隆陽性率達(dá)到95%以上的同時,還能夠又快又好的完成實(shí)驗(yàn),助力發(fā)表高分文章。
在此基礎(chǔ)上,第三屆翌圣生物杯“克隆王"挑戰(zhàn)賽也即將拉開序幕,它不僅是對過往成果的一次集中展示,更是面向未來、促進(jìn)技術(shù)交流與創(chuàng)新的嶄新起點(diǎn)。小翌誠邀每一位科研追夢人共同參與,通過克隆試劑盒,展現(xiàn)你們的克隆藝術(shù),希望通過這場比賽,為大家搭建起一座溝通的橋梁,促進(jìn)克隆技術(shù)的深度交流與智慧碰撞,攜手在這條基因奧秘的發(fā)現(xiàn)之旅上貢獻(xiàn)自身力量!
小翌溫馨提示:2024年5月9日前,掃描下方二維碼填寫報名信息,可獲得5分附加分,先報先得哦~
【克隆王挑戰(zhàn)賽預(yù)報名碼】
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產(chǎn)品分類 | 產(chǎn)品定位 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 規(guī)格 |
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