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細胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測
閱讀：947 發(fā)布時間：2015-4-7| 提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 34KB |
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主要用途
細胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA，受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放黃色對硝基苯胺，產生吸光峰值的變化，即采用比色法來測定細胞裂解萃取樣品中酶活性的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品（動物、人體、昆蟲等）半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3）的活性檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。
技術背景
半胱氨酸蛋白酶（Cysteine-requiring Aspartate protease；CASPASE），或稱半胱天冬蛋白酶，是調節(jié)細胞凋亡的一類蛋白酶家屬。半胱氨酸蛋白酶-3 （CASPASE-3；EC3.4.22.56）是半胱氨酸蛋白酶家屬中CED-3（Cell Death Gene Number 3；秀麗隱桿線蟲細胞死亡基因數(shù)3）分支的一種，又稱CPP32（Cysteine Proteinase Protein 32 kd；半胱氨酸蛋白酶蛋白32）、apopain（凋亡素）、Yama（印度傳說中的死亡之神）等。半胱氨酸蛋白酶-3前體為32kd，被切離為17kd和11kd而激活細胞凋亡。其底物是多聚ADP-核糖多聚酶（poly（ADP-ribose）polymerase；PARP）、半胱氨酸蛋白酶激活DNA酶抑制劑（ICAD）等。半胱氨酸蛋白酶-3的活性檢測用來評價細胞或組織的凋亡狀況。基于人工合成的四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA（acetyl-Asp-Glu-Val-Asp -p-Nithoaniline；乙酰天冬氨酰谷氨酰頡氨酰天冬氨酰對硝基苯胺）受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放有色對硝基苯胺，在分光光度儀（405nm 波長）下，測定吸光峰值的變化，來定量測定半胱氨酸蛋白酶-3的活性。半胱氨酸蛋白酶-3反應系統(tǒng)為：