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概述ELISA試劑盒質(zhì)量管理

時間：2013-9-26閱讀：289

Elisa試劑盒簡單概述：
●ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測，既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點，已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)和細胞因子等領(lǐng)域。ELISA試劑盒的影響因素較多，加強質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。

分析前質(zhì)控
●人員培訓(xùn) 實驗是***作的，因此檢驗人員需經(jīng)過培訓(xùn)，熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術(shù)知識：
◎檢驗項目的基本原理（ELISA試劑盒原理）；
◎臨床意義；
◎熟悉檢測技巧，了解易出差錯的環(huán)節(jié)及難點；
◎熟悉檢測試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）；
◎ 熟悉檢測儀器的原理及性能；掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識。
◎某些特殊項目的檢測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班，考試合格后持證上崗。

分析前質(zhì)控
1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗發(fā)展為ELISA試劑盒技術(shù)。
特點：在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑"
酶標記免疫活性物質(zhì)，進行信號放大；
有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程；
靈敏度特異性相對較高。
局限性：只能檢測到ng水平
精密度差（批內(nèi)CV15-20%）；
線性范圍窄（一個數(shù)量級）；
存在"HD-HOOK"效應(yīng)。

ELISA試劑盒原理
●根據(jù)檢測目的和操作步驟不同有三種基本方法。
●雙抗體（原）夾心法檢測抗原（體）的常見方法，應(yīng)用針對抗原兩個不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標抗體檢測溶液中的抗原（適用于二價以上抗原,不能測小分子半抗原）。
●間接法檢測抗體的方法，利用酶標記的抗抗體（第二抗體）檢測已與固相抗原結(jié)合的抗體。
●競爭法檢測抗原或小分子半抗原、抗體，以測抗原為例，使待測抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結(jié)合，結(jié)果如待測抗原含量越多，與固相抗體結(jié)合的酶標抗原就越少，顯色越淺，二者呈負相關(guān)。