詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 異戊烯半胱氨酸羧基甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 |
英文名稱 | ICMT |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
沒食子一水物 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,AR純度:≥98%
1戊二二鈉鹽(>98%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
氧化鈣(>95%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,BR純度:≥98%
低粘度羥丙基纖維素 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:150~400 mpa.s,BR純度:≥98%
L(+)酒石二鈉二水(>98%,BC ) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BC 純度:95%
鹽吡哆(>98%,BC ) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BC 純度:≥98%
水楊鈉(>99%,USP) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,USP純度:≥95%
3(環(huán)己氨基 )1丙鈉(分子生物學級) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,分子生物學級純度:≥98%
血紅素(>95%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,BR純度:≥97%
聚乙二800 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:≥98%
炔雌;炔雌環(huán)戊 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:USP純度:≥98%
二酶 (比活度:>20 U/mg,BC) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:比活度:>20 U/mg,BC純度:≥96%
化丙啶(>95% (HPLC),BC) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95% (HPLC),BC純度:≥99%
十二基鈉(>95%,Tech Grade) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,Tech Grade純度:≥98%
硅鈉九水(>98%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:98%
5溴3吲哚基βD吡喃半乳糖苷(>98%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
SAMD14 SAMD14一抗 * 0.2ml Pitavastatin Calcium /NK104
CDMP1/GDF5 軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1一抗 * 0.2ml Potassium iodide
RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2) 化RNA聚合酶II CTD一抗 * 0.1ml Praziquan
RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S5) 化RNA聚合酶II CTD一抗 * 0.1ml Praziquan
RNASE4/Angiogenin 血管生成素核糖核酶4一抗(肌性側(cè)索硬化癥蛋白) * 0.1ml Prazosin HCl
DUT 脫氧尿苷三酶DUT一抗 * 0.1ml Prednisolone acetate
Desmoglein 3/DSG3 橋粒芯蛋白3一抗 * 0.1ml Prednisone Acetate
FCAR/CD89 免疫球蛋白A Fc段受體1一抗 * 0.1ml Prednisone Acetate
異戊烯半胱氨酸羧基甲基轉(zhuǎn)移酶抗體100mgSephadex G-100 葡聚糖凝膠G-100 進口69-52-351415-02-296T天冬轉(zhuǎn)酶(AST)HPLC≥98%肺炎衣原體抗體IgM檢測試劑盒20mgHBV preSAb151151-31-4化學試劑泛酰半胱合成酶(PPCS)500mgSephadex G-150 葡聚糖凝膠G-15069-52-389412-79-396T天冬轉(zhuǎn)酶(AST)HPLC≥98%肺炎衣原體抗體IgA檢測試劑盒20mgHBV-DNA72003-83-9化學試劑Kaptin蛋白(KPTN)
500mgSephadex G-150 葡聚糖凝膠G-15069-52-389412-79-396T天冬轉(zhuǎn)酶(AST)HPLC≥98%肺炎衣原體抗體IgA檢測試劑盒20mgHBV-DNA72003-83-9化學試劑Kaptin蛋白(KPTN)10mgSephadex G-150 葡聚糖凝膠G-1507177-48-22415-24-996T轉(zhuǎn)錄激活子5(ATF5)HPLC≥98%肺炎衣原體抗體檢測試劑盒20mgiso-Hyd74299-50-6化學試劑犬尿-3-單加酶(KMO)
10mgSephadex G-150 葡聚糖凝膠G-1507177-48-22415-24-996T轉(zhuǎn)錄激活子5(ATF5)HPLC≥98%肺炎衣原體抗體檢測試劑盒20mgiso-Hyd74299-50-6化學試劑犬尿-3-單加酶(KMO)10mgSephadex G-150 葡聚糖凝膠G-1507177-48-234168-56-496T白介素17F(IL17F)HPLC≥98%肺炎衣原體檢測試劑盒20mgIDH74299-50-6化學試劑己糖激酶(KHK)
10mgSephadex G-150 葡聚糖凝膠G-1507177-48-234168-56-496T白介素17F(IL17F)HPLC≥98%肺炎衣原體檢測試劑盒20mgIDH74299-50-6化學試劑己糖激酶(KHK)2gSephadex G-200 葡聚糖凝膠G-2007177-48-285022-66-896T血小板激活子酰水解酶2(PAFAH2)HPLC≥98%肺特異性X蛋白檢測試劑盒10mgIDH1化學試劑吲哚-N-轉(zhuǎn)移酶(INMT)
2gSephadex G-200 葡聚糖凝膠G-2007177-48-285022-66-896T血小板激活子酰水解酶2(PAFAH2)HPLC≥98%肺特異性X蛋白檢測試劑盒10mgIDH1化學試劑吲哚-N-轉(zhuǎn)移酶(INMT)250mgSephadex G-200 葡聚糖凝膠G-2007177-48-263492-69-396T血管內(nèi)皮生長子受體1(VEGFR1)HPLC≥96%肺耐藥蛋白檢測試劑盒20mghnRNP;RA33化學試劑白介素4誘導蛋白1(IL4I1)