詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體 |
英文名稱 | CCDC43 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
USP6氨基端樣蛋白(USP6NL)重組蛋白英文名稱:Recombinant USP6 N-Terminal Like Protein (USP6NL)
IV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
D/E中和肉湯/D-E中和肉湯/戴伊恩格利中和肉湯/D/E Neutralizing Broth經(jīng)防腐劑或消毒劑處理的樣品增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
哥倫比亞CAN瓊脂基礎(chǔ)/Columbia CAN Agar Base分離革蘭氏陽性球菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠艾氏腹水細(xì)胞英文名稱:EAC
MDA-MB-436(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
改良淋病奈瑟菌選擇性瓊脂平板10塊國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Caco-2,人結(jié)直腸腺細(xì)胞
RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
SW 780(人膀胱移行細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
GST標(biāo)簽蛋白裂解液20 ug20μg、100μg
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
半乳凝素8(GAL8)ELISA Kit for Galectin 8 (GAL8)規(guī)格:48T/96T
骨成型蛋白2(BMP2)ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)規(guī)格:48T/96T
α白蛋白(AFM)ELISA Kit for Afamin (AFM)規(guī)格:48T/96T
對(duì)氧磷酶1(PON1)ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1)規(guī)格:48T/96T
骨形成蛋白15(BMP15)ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 15 (BMP15)規(guī)格:48T/96T
Ⅷ型膠原α1(COL8α1)ELISA Kit for Collagen Type VIII Alpha 1 (COL8a1)規(guī)格:48T/96T
補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH)規(guī)格:48T/96T
補(bǔ)體成分4(C4)ELISA Kit for Complement Component 4 (C4)規(guī)格:48T/96T
胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子1α(PTF1α)ELISA Kit for Pancreas Specific Transcription Factor 1a (PTF1a)規(guī)格:48T/96T
脯酰羧肽酶(PRCP)ELISA Kit for Prolylcarboxypeptidase (PRCP)規(guī)格:48T/96T
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)ELISA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1)規(guī)格:48T/96T
短蛋白聚糖(BCAN)ELISA Kit for Brevican (BCAN)規(guī)格:48T/96T
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體10性花生餅1173-88-220784-60-596T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)HPLC≥98%單核細(xì)胞趨化蛋白4檢測(cè)試劑盒20mgAβ化學(xué)試劑Cochlin蛋白(COCH)50溶性黃豆餅1173-88-292117-94-796T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)HPLC≥98%單核細(xì)胞趨化蛋白3檢測(cè)試劑盒10mgTB化學(xué)試劑中心體BRCA2相互作用蛋白(CNTROB)
50溶性黃豆餅1173-88-292117-94-796T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)HPLC≥98%單核細(xì)胞趨化蛋白3檢測(cè)試劑盒10mgTB化學(xué)試劑中心體BRCA2相互作用蛋白(CNTROB)500mg溶性棉籽餅 水溶性棉籽餅(發(fā)酵)59703-84-392117-94-796T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)HPLC≥98%單核細(xì)胞趨化蛋白2檢測(cè)試劑盒20mgTBA化學(xué)試劑末端脫核糖核轉(zhuǎn)移酶(DNTT)
500溶性棉籽餅 水溶性棉籽餅(發(fā)酵)59703-84-392117-94-796T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)HPLC≥98%單核細(xì)胞趨化蛋白2檢測(cè)試劑盒20mgTBA化學(xué)試劑末端脫核糖核轉(zhuǎn)移酶(DNTT)200m溶玉米蛋白59703-84-381991-99-396TⅠ型膠原交聯(lián)端肽(NTXⅠ)HPLC≥98%單核細(xì)胞趨化蛋白1檢測(cè)試劑盒20mgTP化學(xué)試劑角化蛋白(CNFN)
20溶玉米蛋白59703-84-381991-99-396TⅠ型膠原交聯(lián)端肽(NTXⅠ)HPLC≥98%單核細(xì)胞趨化蛋白1檢測(cè)試劑盒20mgTP化學(xué)試劑角化蛋白(CNFN)500mg土豆浸59703-84-317320-10-496TⅠ型膠原交聯(lián)端肽(NTXⅠ)HPLC≥98%單皰疹病毒抗原-1檢測(cè)試劑盒20mgTT4化學(xué)試劑Claspin蛋白(CLSPN)
500mg土豆浸59703-84-317320-10-496TⅠ型膠原交聯(lián)端肽(NTXⅠ)HPLC≥98%單皰疹病毒抗原-1檢測(cè)試劑盒20mgTT4化學(xué)試劑Claspin蛋白(CLSPN)200mg玉米淀 FA029059703-84-327918-19-096T50kDa核孔蛋白(NUP50)HPLC≥98%單皰疹病毒Ⅱ型抗體IgM檢測(cè)試劑盒20mgT-AOC化學(xué)試劑Calmin蛋白(CLMN)