詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 細(xì)胞分裂周期蛋白2抗體 |
英文名稱 | CDCA2 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
甘草英文名稱:Licorice保存:20℃,避光規(guī)格:1g尼曼匹克C2前體蛋白一抗
牛蒡子英文名稱:Fructus Arctii保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g煙酰腺嘌呤二核苷酶1一抗
唐古特大黃英文名稱:Rheum tanguticum保存:20℃,避光規(guī)格:0.6g鈉離子/氫離子交換蛋白3一抗
公藤英文名稱:Ding Gongteng保存:20℃,避光規(guī)格:1g化鈉離子/氫離子交換蛋白3一抗
179去穿心蓮內(nèi)19英文名稱:17 hydrogen 9 dehydro andrographolide 19 sulfate保存:20℃,避光規(guī)格:20mg神經(jīng)毒性因子ICP34.5(單純皰疹Ⅰ型)一抗
牛皮特征肽A英文名稱:Leather characteristics of peptide A保存:20℃,避光規(guī)格:10mg/支核孔復(fù)合體蛋白一抗
808猩紅英文名稱:808 scarlet保存:20℃,避光規(guī)格:10mg/支嘌呤霉素敏感性肽酶蛋白一抗
松香英文名稱:Rosin acid保存:20℃,避光規(guī)格:10mg神經(jīng)母細(xì)胞瘤源性分泌蛋白一抗
銀杏內(nèi)K英文名稱:Ginkgolide K保存:20℃,避光規(guī)格:20mg/支核因子1B一抗
九香蟲英文名稱:Nine pest保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g維誘導(dǎo)神經(jīng)母細(xì)胞瘤蛋白1一抗
驅(qū)蟲斑鳩菊英文名稱:Vernia anthelmintica Willd保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g轉(zhuǎn)錄延伸因子NELF一抗
自然銅(醋煅)英文名稱:Natural copper (Cu Duan)保存:20℃,避光規(guī)格:1g蛋白激酶C結(jié)合蛋白NELL1一抗
滇桂艾納香英文名稱:Yunnan and Guangxi Ai Naxiang保存:20℃,避光規(guī)格:5g蛋白激酶C結(jié)合蛋白NELL2一抗
葶藶子(獨行菜)英文名稱:Semen Lepidii (Lepidium)保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g核因子1A一抗
五味藤英文名稱:Itsumi To保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g環(huán)一螺旋蛋白1一抗
天名精英文名稱:Carpesium abrotaides保存:20℃,避光規(guī)格:1g腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因H4一抗
青果英文名稱:Chinese olive保存:20℃,避光規(guī)格:1g神經(jīng)元衍生孤兒受體1一抗
細(xì)胞分裂周期蛋白2抗體200mgHeparin Sepharose 6FF 肝素-瓊脂糖凝膠6FF68189-43-52450-53-596T胱天蛋白酶5(CASP5)HPLC≥98%骨形成蛋白4檢測試劑盒20mgAGT590-46-5化學(xué)試劑分泌型蛋白2(SPP2)25mgHeparin Sepharose 6FF 肝素-瓊脂糖凝膠6FF68189-43-514534-61-396T趨化子C-X-C-元配體16(CXCL16)HPLC≥98%骨涎蛋白檢測試劑盒20mgACE590-46-5化學(xué)試劑甾醇-O-酰轉(zhuǎn)移酶2(SOAT2)
25mgHeparin Sepharose 6FF 肝素-瓊脂糖凝膠6FF68189-43-514534-61-396T趨化子C-X-C-元配體16(CXCL16)HPLC≥98%骨涎蛋白檢測試劑盒20mgACE590-46-5化學(xué)試劑甾醇-O-酰轉(zhuǎn)移酶2(SOAT2)75mgHeparin Sepharose H.P. 肝素-瓊脂糖凝膠H.P.108321-07-932451-88-096T趨化子C-X-C-元配體16(CXCL16)HPLC≥98%骨退化特異標(biāo)志物檢測試劑盒20mgACE2107-43-7化學(xué)試劑伸展蛋白(SNPH)
75mgHeparin Sepharose H.P. 肝素-瓊脂糖凝膠H.P.108321-07-932451-88-096T趨化子C-X-C-元配體16(CXCL16)HPLC≥98%骨退化特異標(biāo)志物檢測試劑盒20mgACE2107-43-7化學(xué)試劑伸展蛋白(SNPH)200mgHeparin Sepharose H.P. 肝素-瓊脂糖凝膠H.P.108321-07-91126032-65-296T趨化子C-X-C-元配體16(CXCL16)HPLC≥98%骨特異性性酶B檢測試劑盒10mgEDHF107-43-7化學(xué)試劑N-葡糖化酶(SGSH)
200mgHeparin Sepharose H.P. 肝素-瓊脂糖凝膠H.P.108321-07-91126032-65-296T趨化子C-X-C-元配體16(CXCL16)HPLC≥98%骨特異性性酶B檢測試劑盒10mgEDHF107-43-7化學(xué)試劑N-葡糖化酶(SGSH)2glysine Sepharose 4B 賴-瓊脂糖凝膠4B7365-82-424699-16-996T糖原合酶激酶3α(GSK3α)HPLC≥98%骨髓抑制子1檢測試劑盒10mgVE-CAD64-86-8化學(xué)試劑絲組合子3(SERINC3)
2glysine Sepharose 4B 賴-瓊脂糖凝膠4B7365-82-424699-16-996T糖原合酶激酶3α(GSK3α)HPLC≥98%骨髓抑制子1檢測試劑盒10mgVE-CAD64-86-8化學(xué)試劑絲組合子3(SERINC3)50mglysine Sepharose 4B 賴-瓊脂糖凝膠4B7365-82-429702-25-896T糖原合酶激酶3α(GSK3α)HPLC≥98%骨橋素檢測試劑盒20mgVEGF-A64-86-8化學(xué)試劑生精蛋白Ⅱ(SEMG2)