詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 去整合素樣金屬蛋白酶15抗體 |
英文名稱 | ADAM15 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
亞油(分析標準品,≥99.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,≥99.0%(GC)純度:>95%
隱色結(jié)晶紫(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:>95%
月桂(分析標準品,>99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,>99.5%(GC)純度:>95%
神經(jīng)(分析標準品,≥99.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,≥99.0%(GC)純度:>95%
十五(分析標準品,≥99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)純度:>95%
泛鈣一水合物(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:>95%
山梨鉀(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:>90%
全氟辛(分析標準品, 用于環(huán)境分析) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品, 用于環(huán)境分析純度:>95%
正辛(分析標準品,≥99.9%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,≥99.9%(GC)純度:>95%
蓖麻油(分析標準品,99%) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,99%純度:>95%
硬脂(分析標準品,≥99.5%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)純度:>95%
甜蜜素(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:>95%
L山梨糖(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:>95%
糖精鈉 水合物(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標準品純度:>95%
標準溶液(0.05000mol/L(0.1N)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.05000mol/L(0.1N)純度:>95%
標準溶液(1000μg/ml,溶劑:水) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水純度:>95%
Aldolase A 醛縮酶A一抗 * 0.1ml Piperine
Aldolase C 醛縮酶C一抗 * 0.2ml Piperine
ALF/GTF2A1LF 通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子一抗 * 0.1ml Pneumocandin B0
ALK/CD246 間變型淋巴瘤激酶一抗 * 0.2ml Formoterol
CDC27/ANAPC3 后期促進復(fù)合蛋白3一抗 * 0.1ml Homatropine Methyl Bromide
CO4A2 膠原蛋白4a2亞基一抗 * 0.2ml Abiraterone Acetate
REM/GTP binding protein REM1 GTP結(jié)合蛋白REM1一抗 * 0.2ml Brimonidine
Laminin 1+2 層粘連蛋白1+2一抗 * 0.1ml Asulam
去整合素樣金屬蛋白酶15抗體G蛋白偶聯(lián)受體GPRSP2蛋白抗體Diethyl 2-acetamido-2-phenethylmalonate中文名:別名:分子式:C17H235
G蛋白偶聯(lián)受體GPRC5C蛋白抗體Diethyl 2-acetamido-2-(4-octylphenethyl)malonate中文名:別名:分子式:C25H395
配子生成素結(jié)合蛋白1抗體Tropisetron hydrochloride中文名:鹽酸托烷司瓊別名:分子式:C17H21ClN2O2
鋅指蛋白403/喉癌相關(guān)蛋白1抗體Tricetyl fingolimod中文名:別名:N-[1,1-Bis[(acetyloxy)methyl]-3-(4-octylphenyl)propyl]acetamide分子式:C25H395
胰島素樣生長因子1受體相互作用蛋白1抗體Fingolimod hydrochloride中文名:鹽酸芬戈莫德別名:FTY720; Gilenya分子式:C19H34Cl2