詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產品名稱 | 乙酰化組蛋白H1b抗體 |
英文名稱 | Acetyl-Histone H1.4 (K53) |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
高峰淀粉酶來源于米曲霉(4000U/g) 進口/國產 規(guī)格:BR,4000u/g純度:98%
高峰淀粉酶來源于米曲霉(100U/mg ) 進口/國產 規(guī)格:BR,100 U/mg純度:≥98%
甘油醛3脫酶 進口/國產 規(guī)格:BR,75U/MG純度:≥98%
菠蘿蛋白酶 進口/國產 規(guī)格:>500U/MG,BR純度:≥98%
輔羧酶;羧化輔酶;焦素 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
吲哚乙 進口/國產 規(guī)格:0.97純度:≥97%
α環(huán)糊精 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:>98% >94%
氧化酶(XOD) 進口/國產 規(guī)格:BR,>7U/MG, powder純度:≥97%
?;?/font>,L氨基?;? 進口/國產 規(guī)格:酶活力≥30000u/g純度:≥94%
胰蛋白酶1:250 進口/國產 規(guī)格:>250U/mg,BR純度:≥95%
胰蛋白酶1:2500 進口/國產 規(guī)格:>2500U/MG純度:≥95%
阿利多 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:98%
核糖核酶A(美侖);RNase A;核糖核酶I 進口/國產 規(guī)格:≥50 U/mg,美侖純度:98%
5‘吡哆醛,一水 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(羅氏) 進口/國產 規(guī)格:>95%,羅氏進分純度:≥98%
NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(美侖) 進口/國產 規(guī)格:>97%,國產美侖純度:≥98%
CARM1 蛋白精氨N基4一抗 * 0.1ml Agarose
BTN2A2 嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2一抗 * 0.2ml PEG 400
AMPK alpha 1/PRKAA1 腺苷單活化蛋白激酶α1一抗 * 0.1ml Cholestyramine resin
phosphoAMPK alpha 1(Thr172) 化腺苷單活化蛋白激酶α1一抗 * 0.1ml Sucrose
TP53TG3 p53靶蛋白3一抗 * 0.2ml D(+)Trehalose, dihydrate
TP53TG5 p53靶蛋白5一抗 * 0.2ml Sodium chloride
TSPYL5 特異性Y蛋白樣5一抗 * 0.2ml Guanidine hydrochloride
UBTD1 泛素結構域蛋白1一抗 * 0.2ml Adonitol
乙?;M蛋白H1b抗體2號染色體開放閱讀框49抗體threo-7-O-Methylguaiacylglycerol β-coniferyl ether中文名:別名:分子式:C21H26O7
2號染色體開放閱讀框50抗體Fargesin中文名:辛夷脂素別名:(+)-Fargesin分子式:C21H22O6
科凱恩氏綜合癥相關蛋白/早衰蛋白CSA抗體Deoxyschizandrin中文名:五味子甲素別名:Schisandrin A分子式:C24H32O6
7號染色體開放閱讀框65抗體Schisandrin B中文名:五味子乙素別名:分子式:C23H28O6
磷酸化絲切蛋白抗體Arctiin中文名:牛蒡子苷別名:分子式:C27H34O11