詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 多功能DNA修復(fù)酶抗體 |
英文名稱 | APE1 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
彈性蛋白酶 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:30 units/mg純度:≥98%
脂肪酶 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20000U/g,BR純度:≥95%
木聚糖酶 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,6萬U/G純度:≥98%
透明質(zhì),玻尿(分子量80萬150萬) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,BR,M.W:80萬150萬純度:≥94%
透明質(zhì),玻尿,醣醛(分子量3K) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,BR,M.W:3000純度:≥94%
透明質(zhì),玻尿,醣醛(分子量10K) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,BR,M.W:10000純度:≥98%
透明質(zhì),玻尿,醣醛(分子量90K) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,BR,M.W:90000純度:鑒別用(80%)
透明質(zhì),玻尿,醣醛(分子量4K) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,BR,M.W:4000純度:≥98%
羅哌卡因 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%純度:≥95%
羅哌卡因(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標準品純度:97%
醋棉 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97.5%,BR純度:≥98%
過氧化酶(牛肝臟) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:2,0005,000 units/mg,進分純度:95%
他唑巴坦,他唑巴坦 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:97%
他唑巴坦(標準品) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC>99%,標準品純度:≥98%
NAD;氧化型輔酶I;β煙酰腺嘌呤二核苷水合物 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
NAD;氧化型輔酶I;β煙酰腺嘌呤二核苷水合物 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
PCNT/Pericentrin 中心粒周蛋白一抗 * 0.2ml DBiotin
Importin4/RanBP4 核蛋白4一抗(Ran結(jié)合蛋白4) * 0.2ml Glycerol
MIS12 染色體及有絲分裂蛋白MIS12一抗 * 0.2ml Sodium citrate, trisodium salt, dehydrate
CDCA1/Nuf2 細胞分裂周期相關(guān)蛋白1一抗 * 0.2ml Gelatin
Importin 9/RanBP9 核蛋白9一抗(Ran結(jié)合蛋白M) * 0.2ml Yeast extract
SPC25 紡錘體點構(gòu)成蛋白25一抗 * 0.2ml Sodium carbonate anhydrous
CDCA5/Sororin 細胞分裂周期相關(guān)蛋白5一抗 * 0.2ml DFructose
CAPD2/CNAP1 染色體相關(guān)蛋白2一抗 * 0.2ml Riboflavin 5'mophosphate sodium salt hydrate
多功能DNA修復(fù)酶抗體活性依賴的神經(jīng)保護肽抗體2,4,6,6-Tetramethyl-3(6H)-pyridine中文名:別名:分子式:C9H13
α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體Crebanine中文名:克班寧別名:8,9-Dimethoxy-1,2-methylenedioxyaporphine分子式:C20H214
α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)Glycozolinine中文名:別名:6-Methyl-9H-carbazol-3-ol; Glycozolil分子式:C13H11
核突觸蛋白抗體Siacutine中文名:青風藤堿別名:分子式:C19H214
β-肌動蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體)Pterolactam中文名:別名:5-Methoxy-2-pyrrolidine分子式:C5H92